pcr跑不出来该如何解决

之前跑出来过，后面换了个模板就再也没跑出来过。

1.引物：引物设计应该没有问题，因为之前用这个引物跑pcr是有条带的，现在电泳也能看见引物二聚体，但是没有目的条带，这能说明我的引物没有失效吗？

2.酶：用过takara的高保真酶和TianGEN的超强高保真酶，都没跑出目的条带，但实验室师姐有用这个酶跑出来过，应该也不是酶的问题。

3.模板：我觉得问题就出在模板上，但我换了很多个模板，有自己提RNA反转录的，也有实验室保存的cDNA，都没有条带，真的要崩溃了。

不是第一次遇见这种情况了，以前能跑出来隔了一段时间哪怕就一天就再也跑不出来了，想问一下这种情况应该怎么办呢？可以把第一次pcr的产物作为模板再跑pcr扩增吗？