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求助:SDS-PAGE电泳中溴酚兰指示带弥散的问题

发布于 2003-02-11 · 浏览 4219 · IP 湖南湖南
这个帖子发布于 22 年零 88 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
本人在用组织匀浆跑12%的SDS-PAGE电泳时,发现溴酚兰指示带不紧凑,在泳道的前沿好像有一些弥散的颗粒状东西,这样跑出来的电泳条带和western blot结果也不好看。
1. 不会是匀浆缓冲液的问题。我试过用PBS和Tis-HCl等缓冲液匀浆组织,然后上样。结果都是这样,电泳前沿的蓝色指示带弥散有一些小颗粒,随着电泳前移。 而我们用PBS配的蛋白质Marker却没有这种情况。
2. 不会是点样量的原因。经定过蛋白定量后上样(每道40ug),也没有改善。
3. 也不会是SDS-PAGE胶的原因。因为同一块胶上点的蛋白质Marker泳道很正常。
4. 样品在上样前经过离心,取上清点样。
5. 我用这种匀浆的样品做IP后,再用IP产物跑SDS-PAGE电泳,结果还是一样。
我觉得是样品出了什么问题,但不知如何解决。 :(
请哪位有过这方面实验经验的高手指点!








最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 4219

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