【求助】大虾帮忙看看如何优化PCR体系？
这个帖子发布于 19 年零 70 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
该如何进行PCR的优化，我是做PCR，是从植物基因组中直接PCR，有出现可能的目的条带，但是条带一直非常的淡，我扩增2.5K，体系是：
ddH2O:9.7微升
MgCl2(25mM) 1.6微升
dNTP(10mM) 1.6微升
引物1（4mM)2微升
引物2（4mM)2微升
10×BUFFER2微升
模板DNA1微升（约50ng)
0.1 微升ExTaq酶
总体系是20微升。
条件是：94预变性3.30
94 30秒
65 45秒
72 1分钟
共35个循环。
该如何优化呢？谢谢了！我已经做了快两个月了，一直都是这样的。
:(
ddH2O:9.7微升
MgCl2(25mM) 1.6微升
dNTP(10mM) 1.6微升
引物1（4mM)2微升
引物2（4mM)2微升
10×BUFFER2微升
模板DNA1微升（约50ng)
0.1 微升ExTaq酶
总体系是20微升。
条件是：94预变性3.30
94 30秒
65 45秒
72 1分钟
共35个循环。
该如何优化呢？谢谢了！我已经做了快两个月了，一直都是这样的。
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