[原创]Semi-Quantitive RT-PCR 实例引申
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用RT-PCR来比较mRNA的表达水平实在是没钱做realtime PCR时的无奈之举。但科研经费有限并不能成为论文水平低下的辩护词，合理运用各种试验方法是保证结论科学性的前提。RT-PCR在定量分析方面究竟能做到什么水平？这个方法的反应动力学曲线究竟是怎样的？下面报告本人最近作的一个小实验，也许有助于大家正确评价和运用半定量RT-PCR。
Semi-Quantitive RT-PCR在实施时涉及三个环节：
1、 确定最佳PCR循环次数；
2、扩增目标序列和内参序列；
3、凝胶分析。
图1 是对目标序列做的一个预试验。横坐标是PCR循环次数，纵坐标是不同循环次数时PCR产物的凝胶分析结果（EtBr染色，ScionImage分析），呈现出一个典型的S型曲线。
Semi-Quantitive RT-PCR在实施时涉及三个环节：
1、 确定最佳PCR循环次数；
2、扩增目标序列和内参序列；
3、凝胶分析。
图1 是对目标序列做的一个预试验。横坐标是PCR循环次数，纵坐标是不同循环次数时PCR产物的凝胶分析结果（EtBr染色，ScionImage分析），呈现出一个典型的S型曲线。
