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[求助]罗氏公司TUNEL试剂盒检测大鼠大脑石蜡切片为何无阳性结果?

最后编辑于 2022-10-09 · IP 广东广东
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这个帖子发布于 19 年零 220 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我做的标本是大鼠大脑脑梗死石蜡切片看大脑凋亡情况,应该是有凋亡的,可是用了罗氏的TUNEL试剂盒,POD那种,但是却是阴性结果,我是按说明书来做的,步骤如下:
1.石蜡切片脱蜡至水
2.蛋白酶K(说明书上指定的罗氏公司)消化30min
3.PBS冲洗三遍 5min/遍,将多余液体流干
4.3%H2O2灭活内源性过氧化物酶10min
5.蒸馏水洗三次5min/遍
6.在切片上加入Tunel混合反应液约50ul/张,在湿盒内37度避光反应60min。
7、荧光显微镜观察。但结果理想非特异性染色很多。而且看不到阳性标记
8.POD转换 1h
9.DAB显色
但是和阴性对照相比,好像没看见阳性结果,因为本人实验就差这一步了,很急,请各位指点,谢谢!!!









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