[求助]罗氏公司TUNEL试剂盒检测大鼠大脑石蜡切片为何无阳性结果?
1.石蜡切片脱蜡至水
2.蛋白酶K(说明书上指定的罗氏公司)消化30min
3.PBS冲洗三遍 5min/遍,将多余液体流干
4.3%H2O2灭活内源性过氧化物酶10min
5.蒸馏水洗三次5min/遍
6.在切片上加入Tunel混合反应液约50ul/张,在湿盒内37度避光反应60min。
7、荧光显微镜观察。但结果理想非特异性染色很多。而且看不到阳性标记
8.POD转换 1h
9.DAB显色
但是和阴性对照相比,好像没看见阳性结果,因为本人实验就差这一步了,很急,请各位指点,谢谢!!!