关于PCR的方法验证

本实验室设计了针对于某个细菌多个不同种的引物和探针，并配置成多重PCR体系进行了初步试验，证实是可行的，想对这个检测的体系进行一个效能评价，其中涉及到了特异度，想请教下各位老师同学这个特异度相关的实验应该如何开展，是否需要准备大量的其他病原体样本，具体如何计算？