我遇到的PCR问题
1 gtgcagtggc tcaatctcgg ctcactgcaa gctccgcctc ccaggttcat gccattctcc
61 tgcctcagcc tacatagtag ctgggactac aggtgcccgc caccacacct agctaatttt
121 ttgtattttt agtagagacg gggtttcatc atgttagcca ggatggtctc gatctcctga
181 cctcccaaag tggtgggatt acaggtgtga gccactgcgc ccggctggat gactcttgag
241 acaacaccat tcagacaaag gcaaggcctc ccacttaaac tcataaccgt gtctcctttc
301 tctccttcga tttgagcggc tgaatttggt tacagtcatc tgacctgtgg gtgtgaagtc
361 cacctgcctg gcataaaaag ctgtgcctcc tttctaggtg aggagaaaga gagagacctg
421 gctcatctga ggtgtggttg ggagggggga cccaggtgtg ctggaaatga aaagaaatgc
481 attcctgttt ttcgtcccaa catgcaaaca actgaacaaa agcattaggg cctgagactg
541 ggagtaaaga attccttgtc accatggata ccaggaaatg gccccactta tatataataa
601 gggctttaga gatgctggac catctgatat tccagcctgg ggccacatgg gagtgtgccc
661 tggtgttatt ccttatacag ttccatgaac atggctctgg aaacacctct gtctgcagaa
721 aatgaggctt ttcttttttt gttcgggggt gaacagaggg cagaggcctg ggcatcttca
781 ctcagcaccc ctttgtaacc cagcacttag caccatggct ggcgcacagc aatgtcacat
841 gtgtgagtgc acacgatgcc tcactgccag gggtcacccc acaccggtgc tgttgggggc
901 gttggagtgg ttatctcttc tttagtcctc aagctcctac ctggcagaga gctgcccaac
961 accgtcgggg tggggtgggc gggaagggaa gaagcagcag caagaaagaa gccccctggc
1021 cctcactctc cctccctgga cgccccctct tcgaccccat cacacagccg cttgaggctt
1081 ggaggcagtg gatttccgag cctgggaacc ccggcgtctg tccggtgtcc ccgcagcctc
1141 acccgtgctg gcccagcccc cgcgagttcg ggacccgggg tttccggggt ggcagggggt
1201 tcccatgccg cctgcgaggc ctcggctcgg gccgctcccg gaacctgcac ttcaggggtc
1261 ctggtccgcc gcccccagca ggagcaaaac aagagcacgc gcacctgccg gcccgcccgc
1321 ccccttggtg ccggccaatc gcgcgctcgg ggcggggtcg ggcgcgctgg aaccagagcc
1381 ggagccggat cccagccgga gcccaagcgc agcccgcacc ccgcgcagcg gctgagccgg
1441 gagccagcgc agcctcggcc ccgcagctca agcctcgtcc ccgccgccgc cgccgccgcc
1501 gccgccgccg cccccggggc atggcc
tgtc tgatggccgc tttctcggtc ggcaccgcca
1561 tggtgagtga gcgcatcctt cgtccgccgg gaacggtttt attttcaagg
红色区域是我需要扩增的启动子区域,GC含量较高。
我设计的引物是:
上游:5'ccctcgagaacccagcacttagcaccatg3'
下游:5'ccaagcttaccgagaaagcggccatcag3'
能帮我看看么,小女子这厢在此先行谢过了~