极光激酶A表达对甲状腺髓样癌切除术后患者生化治愈的影响作用研究

甲状腺髓样癌（MTC）是一种较为少见的神经内分泌肿瘤，起源于分泌降钙素的甲状腺滤泡旁细胞（C细胞）［1］，其通过编码的蛋白质传递异常信号促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移，预后比分化型甲状腺癌（DTC）差［2］。MTC侵袭性强，容易出现淋巴结转移及远处转移。在触及颈部肿块的MTC患者中，70%伴有颈部淋巴结转移，10%有远处转移［3］。MTC的发病、诊断和治疗都与常见的甲状腺乳头状癌不同，需要进一步改善整体治疗策略，寻找能够更好进行辅助治疗、降低复发的新靶标。

MTC初次术后的患者常被分为4类：（1）生化治愈，影像学检查无残余肿瘤，术后血清降钙素和/或癌胚抗原（CEA）降至参考范围内；（2）解剖治愈，影像学检查无残余肿瘤，降钙素和/或CEA水平升高；（3）解剖残留，持续存在的残留肿瘤或远处转移；（4）疾病状态不稳定，非特异性的各项检测异常［4］。完整切除肿瘤者术后降钙素水平可以降至检测水平以下，达到生化治愈，这部分患者预后较好，10年存活率达95%~97%［5］。术后血清降钙素也是监测疾病复发或转移、进展和持续存在的重要因素，但是关于血清降钙素的临界值尚有争议。

极光激酶A（Aurora A）作为调节中心体和微管功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在细胞有丝分裂以及减数分裂的正常进程中起着至关重要的作用［6］。近年研究发现Aurora A在头颈部肿瘤、乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌及胃癌等多种肿瘤组织中均存在高表达［7-11］，并可影响肿瘤细胞增殖、迁移、干性维持等多种生物学行为，同时与患者生存及预后显著相关［12］。此外，Aurora A抑制剂MLN8237能够明显抑制甲状腺癌的增殖能力［13］，这表明Aurora A有望成为甲状腺肿瘤新的治疗靶点。本研究通过对MTC患者切除术后血清中的降钙素水平与Aurora A高表达的相关性进行初步研究，旨在探究Aurora A评估MTC患者切除术后能否获得生化治愈的价值。

1　对象与方法

1.1　研究对象　选取2011年2月—2019年7月于天津医科大学肿瘤医院甲状腺头颈部肿瘤科就诊住院并行肿瘤切除的MTC患者90例。纳入标准：（1）术前未接受过放化疗等与肿瘤相关的治疗；（2）术后病理诊断为MTC。排除标准：（1）儿童型MTC及无淋巴结清扫；（2）手术未能切除病灶；（3）合并其他恶性肿瘤，术前接受过放化疗等治疗；（4）MTC复发再次手术。所有患者对本研究知情同意，本研究经天津医科大学肿瘤医院伦理委员会批准（EK2022260）。

1.2　研究方法

1.2.1　患者资料收集　收集患者的临床资料，包括患者性别、年龄、病灶位置、病灶数量、膜外侵犯情况、肿瘤最大长径、TNM分期情况、临床分期情况、生化治愈情况、是否复发等。

1.2.2　免疫组化检测患者MTC组织Aurora A的表达水平　收集患者MTC组织的石蜡包埋进行切片，脱蜡、乙醇脱水、抗原修复，使用过氧化氢阻断过氧化物酶，5%牛血清白蛋白封闭，滴加200 μL Aurora A一抗（抗体浓度1∶200）过夜，冲洗后滴加兔二抗室温孵育2 h，磷酸缓冲盐溶液清洗后滴加二氨基联苯胺显色液，冲洗后苏木素复染，乙醇脱水、二甲苯脱水晾干后中性树胶封片，光镜下观察。由2位高年资经验丰富的病理科医师指导收集病理标本和阅片。免疫组化最终评分为染色强度与染色比例相加。染色强度评分为：0分为阴；1分为弱；2分为温和；3分为强劲（图1）。阳性细胞频率定义为：0分为<25%；1分为26%~50%；2分为51%~75%；3分为>75%。总分0~1分为Aurora A低表达，2~6分为Aurora A高表达。

1.2.3　随访　本研究的随访方式包括电话随访或通过电子病历系统查询患者就诊记录。术后第1个月开始随访，每6个月随访一次，复查降钙素、CEA，随访终点为出现复发或转移，随访截至2021-12-31。

1.2.4　诊断标准　MTC临床分期依据美国癌症联合委员会第8版分期指南（AJCC 8th）。生化治愈指术后末次随访血清降钙素<5 ng/L。复发指术后6个月以上出现颈部淋巴结转移并经病理检查确诊MTC转移。

1.3　统计学方法　采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析。计数资料以相对数表示，组间比较采用χ2检验。采用多因素Logistic回归分析探讨MTC患者获得生化治愈的影响因素。以P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1　MTC患者一般情况　共纳入MTC患者90例，年龄19~74岁，中位年龄53岁；其中男40例，女50例；Aurora A高表达62例，Aurora A低表达28例；肿瘤直径≤2 cm的患者55例，肿瘤直径> 2 cm的患者35例；临床分期Ⅰ/Ⅱ期31例，Ⅲ/Ⅳ期59例；40例患者实现生化治愈，18例患者出现复发。

2.2　不同Aurora A表达水平患者临床资料对比　Aurora A高表达患者的性别、腺外侵犯情况、最大肿瘤长径、T分期、N分期、AJCC 8th临床分期、生化治愈情况、复发情况与Aurora A低表达患者比较，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.3　不同生化治愈情况患者临床资料对比　生化治愈患者的性别、病灶数量、T分期、N分期、AJCC 8th临床分期、Aurora A表达情况与未生化治愈患者比较，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.4　MTC患者生化治愈影响因素的多因素Logistic回归分析　以是否生化治愈（赋值：是=1，否=0）为因变量，以2.3中差异有统计学意义的结果〔性别（赋值：男=1，女=0）、病灶数量（赋值：多灶=1，单灶=0）、T分期（赋值：T3/T4=1，T1/T2=0）、N分期（赋值：N0=0，N1a=1，N1b=2）、AJCC 8th临床分期（赋值：Ⅲ/Ⅳ期=1，Ⅰ/Ⅱ期=0）、Aurora A表达情况（赋值：高表达=1，低表达=0）〕为自变量进行多因素Logistic回归分析，结果显示多发病灶〔OR=3.18，95%CI（1.01，9.97），P=0.047〕、T3/T4分期〔OR=3.69，95%CI（1.05，12.93），P=0.042〕、Aurora A高表达〔OR=3.22，95%CI（1.07，9.74），P=0.038〕是MTC患者生化治愈的影响因素，见表3。

3　讨论

MTC是恶性程度较高的肿瘤，对放疗、化疗不敏感，131I治疗无效，目前手术是唯一的治疗手段。MTC复发率高，容易发生淋巴结转移和远处转移，是患者预后差的主要原因［14］。张诠等［15］的回顾性研究中，MTC患者5、10、15年累积生存率分别为87.4%、74.6%和54.2%；年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期以及生化治愈等多种因素影响MTC的预后。然而临床上常出现同一临床分期MTC患者预后不同的情况，因此寻找影响MTC预后的因素至关重要。

Aurora A是一种与中心体分离、细胞有丝分裂密切相关的蛋白激酶，已被证明参与了多种肿瘤的发生和进展［16］。除了在有丝分裂中发挥作用外，研究表明Aurora A可以激活多种信号通路，如磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B、雷帕霉素靶蛋白、Wnt/β-连环蛋白和核转录因子κB信号通路，而肿瘤的发生需要多种信号通路之间的相互作用［17-20］。Aurora A抑制剂能够抑制髓样癌细胞系的增殖能力并触发细胞凋亡，证明了Aurora A抑制剂在MTC治疗中的治疗潜力［21］。另一项研究发现肿瘤直径与淋巴结转移及远处转移均有关，尤其是原发肿瘤直径>2.5 cm对生存有显著影响［22］。为增加样本量，本研究将肿瘤直径2 cm作为分层依据，研究发现Aurora A高表达与最大肿瘤直径>2 cm有关。

MTC是内分泌肿瘤，合成多种生物学物质，包括降钙素、促肾上腺皮质激素、组织胺、癌胚抗原和血管活性肽。降钙素是由甲状腺滤泡旁细胞分泌的多肽激素，可作为MTC特异性肿瘤标志物，与肿瘤负荷密切相关［23］。降钙素水平也是术后监测患者是否发生复发转移和肿瘤负荷的重要指标，但是降钙素的最佳分界值及时间还没有定论，定义生化治愈的降钙素的分界值也不同［24-25］。一项纳入了1 094例MTC患者的meta分析显示MTC术后出现生化复发患者的复发率、死亡率均高于术后降钙素水平正常患者［26］。MOMIN等［24］通过分析1 026例MTC患者发现阳性淋巴结的数量会影响生化治愈率。MATHIESEN等［27］对MTC患者17年的随访研究发现远处转移预示着更差的预后，而没有颈部淋巴结转移则预示可能实现生化治愈。另一项研究对MTC患者进行了长达30年的随访，认为术后6个月没有获得完全生化缓解（降钙素<10 ng/L且无解剖性复发）是对MTC术后复发影响最大的因素［28］。本研究通过收集MTC患者术后6个月血清降钙素的复查资料，发现Aurora A高表达是MTC患者生化治愈的影响因素。不同性别研究对象术后血清降钙素水平也存在不同，还需多中心、大样本人群的长期随访。

本研究存在以下局限性：研究的样本较少，且未进行Aurora A表达和术前降钙素水平相关性研究。此外未进行MTC患者生存期的随访，未得到Aurora A高表达与无病生存率的相关性。鉴于以上缺点及局限性，未来会开展多中心、大样本、前瞻性临床试验。

综上所述，MTC是一种恶性程度较高的甲状腺恶性肿瘤，容易出现复发转移，Aurora A蛋白在MTC中出现高表达，其高表达与MTC腺外侵犯、肿瘤的大小、生化治愈、TNM分期、临床分期、复发有关，其中Aurora A高表达是患者未能获得生化治愈的影响因素。提示Aurora A蛋白可作为评估MTC术后是否复发的生物指标之一，其具体的分子机制还需要进一步研究。

本文无利益冲突。

参考文献略

本文来源：赵泽玮，康宁，郭丰丽，等. 极光激酶A表达对甲状腺髓样癌切除术后患者生化治愈的影响作用研究［J］. 中国全科医学，2023，26（20）：2508-2512. DOI：

10.12114/j.issn.1007-9572.2022.0883.