hplc 纯化 rna 的时间是多少呢

丁香实验

发布于 2023-02-17 · 浏览 1252 · IP 浙江浙江

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48 小时内有问必答~

Q：hplc 纯化 rna 的时间是多少呢

A1：一般是半个小时之内就可以纯化成功。

A2：hplc 纯化 rna 的时间是 15 至 30 分钟。

A3：HPLC 纯化 RNA 的时间取决于 RNA 样品的大小、复杂性和浓度等因素。通常情况下，纯化 1-2 mg 的 RNA 样品可能需要 2-4 小时。但是这只是一个大致的参考时间，具体的时间还需要根据实验室中使用的纯化设备和实验条件来确定。在纯化 RNA 之前，最好进行RNA的初步纯化和浓缩，以便更快速和有效地进行 HPLC 纯化。

Q：RNA 保存液储存的临床标本可以用来测转录组学？想知道这个保存液保存的会不会引起 RNA 的降解

A1：一般不会，rna 在保存液中性质比较稳定

A2：在正常储存保存液的条件下，是可以用来测转录组学的。

A3：RNA 保存液储存的临床标本可以用来测转录组学。

一般来说，使用RNA保存液可以有效保护 RNA 的完整性和稳定性，适合于 RNA 后续分析，包括转录组学分析。

不过需要注意的是，储存 RNA 的样本和 RNA 保存液要避免高温、冻融和长时间的存储，这些因素都会对 RNA 的完整性造成影响。另外，对于临床样本的 RNA 提取，也需要严格按照操作规范进行，以保证提取得到的 RNA 质量和数量满足后续转录组学分析的要求。

Q：我买了吉玛的三保一 siRNA，转染后跑了三个 siRNA 的 qpcr，结果不仅没沉默，反而全部上调了，有没有大神知道是怎么一回事啊？NC 组和空白组差异不显著，管家基因的 CT 值从 17 左右上升到 19 左右，转染后 24h 收的样，求求大神指点迷津啊

A1：1试试转染后 48h 收样，24h 时间有点短 2注意一下你的 qpcr 的引物的 melt curve是否是单峰

A2：应该是转染效率太低了，转染效率低导致进入细胞的 siRNA 比较少，刺激细胞产生应激反应，导致目的基因不降反而升高，转染效率高的话就没事了。

PS：如果转染效率很好，但没有干扰，是序列不行，要换干扰序列。

A3：三个 SiRNA 全部上调可能是由于转染的 SiRNA 浓度过高，导致了细胞的非特异性反应。另外，还有可能是您的 qPCR 实验出现了技术问题。建议您重新检查 SiRNA 的浓度和质量，以及优化 qPCR 实验的条件，例如优化引物浓度和放大条件等。此外，您可以尝试使用其他的 SiRNA 转染试剂或者其他的 SiRNA 设计和合成公司。

Q：在 3matic 的学习中遇到两个问题希望大神解答一下 1.选定一条直线，如何确定它的中点呢？2.如何过一个点做一个面的垂线？

A1：做垂线需要先确定点的位置，然后添加按钮里边选择垂线选项。

A2：在 3matic 中，你可以通过以下步骤确定直线的中点：

选择该直线。

在“几何操作”菜单中选择“创建”选项。

在“创建”对话框中选择“中心”选项。

选择该直线作为第一个特征，点作为第二个特征，并点击“确定”按钮。

如何过一个点做一个面的垂线？

在3matic中，你可以通过以下步骤过一个点做一个面的垂线：

选择该点。

在“几何操作”菜单中选择“创建”选项。

在“创建”对话框中选择“垂线”选项。