Wb经验帖‖不同文献,蛋白分子量不一样?(目的蛋白几个分子量?)
以下是个人看法、个人见解及处理原则。

1:站友提的问题很有意思!怎么理解呢?
这是正常的现象,因为不同抗体公司生产抗体的时候,所用免疫动物的不同片段的多肽或者蛋白片段,所以不同公司的抗体具有一定差异化。
比如说我目的蛋白“小黄”,我抗体公司要做“小黄”的特异性抗体,就从“小黄”这个蛋白或者多肽里面掐一段出来,把它设计一个特异性抗体,这个特异性抗体就大概的能代表“小黄”,但是一定是“小黄”吗?不一定!!!!!!因为“小黄”的姐姐或者妹妹也有这么一段东西呢?也就是说,你找“小黄”,你这个抗体公司用双眼皮去找,估计有十个双眼皮的待定“小黄”。
但是另一个抗体公司,用小黄“额头有璇、而且有两个酒窝”设计的抗体去找小黄,这就很奏效了,找出来的可能就是一个了。
(暴露了我的长相😂😂😂😂)
还有可能是目的蛋白自身的修饰化。跟我前几天发饶毅老师公众号的图原理差不多。(如下是饶毅老师的推文原图,我还发了文章调侃,我得跑多久才能跑出来。)

以上是饶老师前几天发的推文中的图,第六张,也是我红线标识的地方。这个图6就6在你抗体一样,然后你不同分子量的地方有显影。说明一个问题,这个操作使得有修饰化表达,故而造成了,这种不同分子量的蛋白出现。

2:如何处理这种情况?
第一个找大家文章发的比较多的分子量啊,他们家的抗体666啊。大家觉得对了,你就对了,你要争辩,你可真叛逆!
这是我之前发的帖子,如何找别人发的比较多的抗体公司。
第二个,裁膜呗…
就是说你确定了分子量以后,就去裁膜,裁一个差不多大小的,盖住目的蛋白分子量左右。
不要摊煎饼似的,一张膜把一块胶给封住了,这样也就扩大了搜索范围。
比如小黄+额头有璇+酒窝=中国的小黄,但是你膜贴的大,扩大到全世界找额头有旋+酒窝,那估计有白色的小黄,还有黑色的小黄了。所以你知道目的蛋白分子量之后,不要贴一张膜覆盖整块胶。搞小一点嘛!!!!
光看不点赞,就是耍流氓!!!
最后编辑于 2022-11-15 · 浏览 6172