protocol 分享｜水迷宫实验（附图）

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Morris 水迷宫实验，通过强迫受试动物游泳，学习找寻藏于水中平台的一种游泳实验。观察并记录受试动物逃避游泳进而寻找水下平台所用的时长、采用的策略及游泳轨迹，分析并判断受试动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。

一、材料

Morris 实验系统由水迷宫装置、水迷宫图像自动采集和软件分析系统组成。

二、步骤

1. 获得性训练（ 5 d）：

1）将圆形器皿均分为四个区间，其任意一个区间放置平台，且平台低于水面 1 cm，另外三个象限作为小鼠/大鼠的训练定位点。将小鼠依分别从三个象限中点背对圆盘圆心的方式放入水中，使其能自由探索至其寻找平台，记录其移动轨迹和移动时间，最长寻找时间设定为 90 秒，若超过 90 秒未寻到平台，则引导小鼠/大鼠到平台并且让小鼠停留 10 秒，记录小鼠/大鼠的逃避潜伏期为 90 秒；

2）每日在固定时间段训练 4 次，两次时间间隔 15-20 min。每日以小鼠/大鼠四次训练潜伏期的平均值做为小鼠/大鼠当日的学习成绩；

2.探查训练（ 1 d）：

3）第 6 天，撤除站台，进行 60s 的探查实验。随机选择同一入水点将小鼠/大鼠轻柔置于水中，记录小鼠/大鼠在 60s 内的游泳路径以及其在目标象限的停留时间和穿越目标象限的次数，观察小鼠/大鼠的空间定位能力、空间探索过程中的变化规律；

3.对位训练（ 4 d）：

4）实验进行至第 7 天，开始为期 4 天的对位训练。首先，将平台置于原平台对侧象限，后续实验同获得性训练，每天训练 4 次。记录每次小鼠/大鼠找到平台的时间、游泳距离及游泳速度；

4. 对位探查训练（ 1 d）：

5）对位训练结束 24 h 后，进行对位探查训练，方法同对位训练。继而记录小鼠/大鼠 60s 内在目标象限（对位训练时平台所在象限）所用时长及进入该区次数。

三、注意事项

1. 实验时，保证环境安静，保证隔音，避免实验人员交谈及走动；

2. 开展实验后，尽量选择同一时间段进行实验；

3. 尽量提前将受试动物置于水迷宫房间适应环境；

4. 受试动物置于水中时，动作轻柔，不要将动物头部朝下，避免不必要的应激刺激；

5. 实验结束后将受试动物擦干后放置笼内，避免受试动物生病；

6. 固定实验操作人员，且在正式实验前固定操作人员每天对实验动物抚摸 1～2 min，连续 5 天以上，使受试动物熟悉气味，避免应激；

7. 若实验时用牛奶或奶粉搅浑泳池的水时，需要及时更换水以免水腐败变质。

四、常见问题

1. 受试动物在水中漂浮不动:

可能是水温度过高，大鼠温度范围一般为 25 ± 1℃，小鼠可能低些在 18~22℃。

2. 受试动物游几次潜伏期突然增大或出现抽筋、腹泻：

可能是水温度过低，受试体温下很快，游泳不能坚持很久。

参考来源：Alzheimers Research & Therapy. 2020 Apr 24;12(1):47

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