求助 | 慢病毒感染后传代细胞生长缓慢怎么办？求求了，帮我看看
发布于 2022-04-11 · 浏览 2721 · IP 四川四川
这个帖子发布于 3 年零 30 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
在六孔板对MDA-MB-231进行敲低慢病毒（擎科公司）构建，MOI=20，polybrene=5ug/ml，24h换液，嘌呤霉素0.5ug/ml筛选四天之后刚好长满。荧光观察感染效率高，达90+%。
现象：1、胰酶消化，十秒内就终止了，传代到T25培养瓶里面会有一半细胞飘起来死亡（培养液收集起来有少量活细胞贴壁）；2、目的基因敲低的细胞长的非常慢，几乎不长，还会死一些细胞，提高血清浓度到12.5%也没什么变化，对照慢病毒还能维持231原有的生长速度，飘的细胞也相对少一些。
提问：1、慢病毒感染筛选后传代细胞为什么会死这么多啊？2、我应该怎么改善实验条件呢？自己摸慢病毒真的太难了
图片 MOI=10：
图片 MOI=20:
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2721
4 11 1
