HPV假病毒构建
最近在构建HPV11假病毒,买了pL1L2和pEGFP转染到293,24小时观察有荧光,然后收获病毒,用假病毒感染Hacat,一点荧光都没有,很是苦恼,求指导。
说明:假病毒构建转染48h收获,37°裂解24h,冰浴5min,加17体积5MNaCl,冰浴20min,5000g离心,取上清。
将假病毒用DMEM完全培养基稀释,给hacat换病毒液,孵育过夜后再换正常培养基。 在感染8h已经看到细胞有死亡趋势。
最近在构建HPV11假病毒,买了pL1L2和pEGFP转染到293,24小时观察有荧光,然后收获病毒,用假病毒感染Hacat,一点荧光都没有,很是苦恼,求指导。
说明:假病毒构建转染48h收获,37°裂解24h,冰浴5min,加17体积5MNaCl,冰浴20min,5000g离心,取上清。
将假病毒用DMEM完全培养基稀释,给hacat换病毒液,孵育过夜后再换正常培养基。 在感染8h已经看到细胞有死亡趋势。