求助 过表达和抑表达miRNA载体构建
发布于 2020-11-01 · 浏览 1809 · IP 广西广西
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现在需要构建过表达和抑表达miRNA载体，有些疑问
1.我想研究mir-378a-3p，那么是不是只能直接表达成熟体双链？
因为表达pre-miRNA是不是会产生5p的影响？
但直接表达成熟体双链是不是不太稳定？
2.过表达以及抑表达载体分别用什么类型的启动子？
用U6启动子还是常规的CMV启动子的载体？
表达成熟体应该是要用U6启动子载体，加上6个T的终止密码子吧？
表达RNA海绵应该是要用CMV启动子载体吧？
3.RNA海绵载体是否可以按照下图的步骤进行构建？
取mir-378a-3p的反向互补序列，设计3个重复，每个重复间加入-atgcatcg-的间隔序列，再加上6个T终止密码子。
感谢各位老师！！
最后编辑于 2020-11-01 · 浏览 1809
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