我的临床血标本收集以及全血rna提取小总结

看了好多帖子也查了一些东西，简单整理了一下。

因为时间精力有限，不是每管血样都能及时提取rna，所以有一些公司设计了非冷冻全血rna保存液，我查到的比较靠谱的貌似只有qiagen的paxgene？其实是配套了BD特殊采血管（含专利保护rna的成分），可以保存很长时间（网上可以查到介绍），然后搭配qiagen的kit，价格昂贵，望而却步。还有的一家国产公司，貌似叫rnafix? 效果有待考证，没敢尝试。天*恩*泽有一款rnalocker保存全血效果不好，得把白细胞分离出来以后加入，然后还要离心去除，后续搭配trizol/该公司类似trizol的试剂盒。另外全血可能不适合直接加入rnalater或者trizol保存。新鲜全血用trizol也能提出来，但得率和纯度低于白细胞用trizol

我现在采集血样，只留一管紫管，EDTA抗凝血。一部分可以2500至3000rpm离心得血浆（不要贪心，注意别吸到中间的白细胞层，剩下的血细胞层理论还可以再用来提dna/rna）。一部分直接冷冻/冷藏留作dna。剩下的尽快提rna。正经的还是分离白细胞（红细胞裂解液）然后trizol提取（也可以在trizol里保存）。不推荐冷冻保存的全血提rna，易降解，得率低。（虽然rt一般只需要100ng-2ug）（有国产公司biog试剂盒号称可以提取冷冻全血rna，效果呵呵哒，园子里广告多，大家要小心）

提取出来的rna可以加入rna保护剂，负20或许能到半年之久。但还是尽快处理，避免反复冻融。

Rna质量初步判断：普通1%琼脂糖电泳，新的电泳液新的胶洗洗池子100-150v 15min 离加样孔由近及远的依次为28s、18s、5s。5s越亮说明降解的越多。另外，如果，28s是18s亮度约两倍的话，就可以进行下一步实验了。