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RNA提取

临床医学医学生 · 发布于 2021-02-19 · IP 江苏江苏
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这个帖子发布于 4 年零 269 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

1、弃去培养基,PBS洗一遍(针对贴壁细胞),加入1ml Trizol 2-3分钟,用RNase free枪头刮取细胞并转移至1.5ml的EP管

2、加入200ul的氯仿,上下颠倒数次混匀,使细胞裂解充分,室温静置3分钟

3、四度,12000g离心15分钟,离心以后混合物分为三层,取含有RNA的上清约400-500ul

4、往提取的上清中加入500ul的异丙醇沉淀RNA,上下颠倒混匀数次,室温静置10分钟

5、四度,12000g离心十分钟,管壁可见RNA沉淀

6、小心吸取上清液,留取底部RNA沉淀

7、加入1ml百分之七十五的乙醇,上下颠倒悬浮沉淀

8、四度,12000g离心十分钟

9、吸取乙醇,将沉淀置于通风橱,至RNA干燥

10、RNA晾干加入适量的超纯水溶解并测量RNA浓度,负八十保存

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