求助!铜绿假单胞菌慢性肺感染的大鼠模型建立
求助各位大神:本人拟建立铜绿假单胞菌慢性肺部感染的大鼠模型,参考文献中的模型建立方法,其中有一篇文献提到了CaCl2/Tris-HCl缓冲液,但是楼主作为实验小白,只知道Tris-HCl,不知道CaCl2/Tris-HCl是什么,具体的用途是什么,能不能直接购买成品,或者是需要自己配制,恳请大家给予指导
以下为文献建模部分原文:
将PA标准株接种至MHA培养基,于生化培养箱中37℃孵育24h可见菌落生长。挑取MHA 平板上单菌落,置于MHB培养基中,于恒温振荡培养箱中37℃振荡过夜,获得富集PA菌液,12000r/min,4℃离心5min。弃去上清液,用生理盐水调节菌液浓度为1.5×108cfu/ml(麦氏比浊法,相当于0.5麦氏单位)。量取2mlPA悬液和18ml藻酸盐溶液(1.1%)于烧杯中充分搅拌均匀,用1ml注射器缓慢滴入CaCl2/Tris-HCl(0.1mol/L)缓冲液中并持续搅拌1h,弃去上清。加入生理盐水冲洗3次后,重新悬浮于生理盐水中,调节菌液浓度为0.5麦氏单位,并采用平皿表面活菌计数法计数菌落,即得到PA藻酸盐包被体,于4℃保存备用
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 501