求助关于Northern blot的问题

小弟刚接触NB，由于实验室之前也没人做过，做之前想检测下探针的效率，结果曝光后什么也没有，想请园子里做过的前辈帮忙看看指点下，不胜感激。下面是我做的步骤：

我现在使用的探针效率检测流程（罗氏DIG Oligonucleotide 3'-End Labeling Kit,2nd Generation）
1、将尼龙膜用dd水浸湿，放到膜转移缓冲液中5min，置于干燥的滤纸上
2、将自己制备的探针和试剂盒中的Oligonucleotide(DIG-ddUTP labeled)按说明书稀释后点样到尼龙膜上
3、在杂交炉中80°C固定2h
4、20ml马来酸buffer 25°C，2min
5、弃去马来酸buffer，加10ml 1*封阻液 25°C，30min
（封阻液为10*用马来酸buffer现配为1*，但常温下有絮状物，不知道是不是有问题？）
6、弃去封阻液，加10ml抗体（用1*封阻液1：10000现配）25°C，30min
7、弃去抗体，用洗液（0.1 M马来酸，0.15 M NaCl，0.3% Tween 20）洗15min，洗两遍
8、加10ml检测液（0.1 M Tris-HCl, 0.1 M NaCl, pH 9.5）作用5min
9、避光，把膜正面向上放在DEPC水处理过的平皿中，加1ml的CDP-Star（用检测液1：100稀释），25°C，5min
10、从平皿中取出膜，在天能5200成像系统-30°C曝光20min