关于Mono Q柱子用buffer
想请教各位大神,我前期过NI柱,过肝素柱都是用PB buffer,那么得到的馏分要是过monoQ(GE)柱子的话,这个平衡洗脱等能否用PB buffer?这个对柱子有影响吗?应为GE产品介绍上建议是用Tris-cl buffer。可是我过NI和肝素后的馏分用Tris-cl buffer做透析的时候,透析袋里出现了白色的小颗粒,应该是沉淀吧。
1.最终用的HIS wash buffer:
50mM phasphate buffer ,pH8.0
500mM 氯化钠
20% 甘油
1% Triton X-100
0.05% Tween20
0.5% NP-40
250mM 咪唑
2。接着用的最终用肝素 wash buffer:
100mM phasphate buffer ,pH8.0
1M NACL
3.透析出现沉淀时用的TRIS-CL buffer:(也是过Q柱时用的)
40mM Tris-cl ph7.8
10% 甘油
0.5mM EDTA
0.1mM EGTA
1mM DTT
so,想请教大神门以上的“3”buffer 再过Q柱是能否换成PB buffer, 是否可以去掉里边的EDTA EGTA DTT呢?