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关于Mono Q柱子用buffer

最后编辑于 2022-10-09 · IP 江苏江苏
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这个帖子发布于 9 年零 11 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

想请教各位大神,我前期过NI柱,过肝素柱都是用PB buffer,那么得到的馏分要是过monoQ(GE)柱子的话,这个平衡洗脱等能否用PB buffer?这个对柱子有影响吗?应为GE产品介绍上建议是用Tris-cl buffer。可是我过NI和肝素后的馏分用Tris-cl buffer做透析的时候,透析袋里出现了白色的小颗粒,应该是沉淀吧。


1.最终用的HIS wash buffer:

                          50mM phasphate buffer ,pH8.0

                           500mM 氯化钠

                          20% 甘油

                           1% Triton X-100

                           0.05% Tween20

                          0.5% NP-40

                          250mM 咪唑

2。接着用的最终用肝素 wash buffer:

                    100mM phasphate buffer ,pH8.0

                    1M NACL

3.透析出现沉淀时用的TRIS-CL buffer:(也是过Q柱时用的)

                 40mM Tris-cl ph7.8

                10% 甘油

                  0.5mM EDTA

                 0.1mM EGTA

                1mM DTT

so,想请教大神门以上的“3”buffer 再过Q柱是能否换成PB buffer, 是否可以去掉里边的EDTA EGTA DTT呢?




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