请教原代小鼠T细胞慢病毒转染效率
发布于 2016-03-16 · 浏览 9402 · IP 江苏江苏
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请问各位前辈，有人做过原代小鼠T细胞慢病毒转染吗？我按文献，提取脾脏细胞培养一天后加慢病毒和Polybrene，尝试了polybrene2-10μg/ml，病毒MOI 10,30,50，细胞转然后24h明显皱缩、空泡，原计划不刺激T细胞（文献是不刺激，病毒孵育脾脏细胞3天再阴选T细胞，可以收到足够做体内实验的量，10^7以上），只好改为刺激。脾脏细胞CD3/CD28刺激后增殖明显，但是按照预实验T细胞不出现明显凋亡的polybrene浓度或者不加polybrene，病毒MOI 10,30,50转染24h，48h后流式分选，荧光阳性细胞都不到3%。 请问一般大家做慢病毒转原代T细胞转染效率大概多少呢？有什么方法可以提高效率吗？非常感谢！
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 9402
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