【求助】脑片免疫荧光问题（漂片法）

本人最近在做小鼠的免疫荧光遇到些问题，求解答
基本信息如下：
·小鼠cb57BL/6，漂片法 厚度35μm
·目的蛋白为分泌蛋白，根据数据库的数据脑组织中的表达少，主要在皮层神经元，自己染的时候感觉皮层神经元和海马染出来了，还在优化条件中。
·封闭液（10%goat serum+Triton0.3%+PBS），一抗封闭液稀释（1:100） rabbit来源，二抗（1:200）goat anti-rabbit alexa fluor 488；
·PBS洗8minX4次，摇床--室温封闭1h--一抗孵育过夜--PBS洗--二抗室温1h--PBS洗--制片
问题：1.脑室旁边的黑点/团是什么（即荧光部分）【前两张图】
2.对于荧光的优化条件有什么建议没？
3.以前做过感觉染上的，顺便帮看下是不是染上了。
先谢谢各位了。
图片如下