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【求助】Red系统对大肠杆菌基因敲除

发布于 2015-04-12 · 浏览 8066 · IP 黑龙江黑龙江
这个帖子发布于 10 年零 22 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

最近在做red系统(PKD46,PKD3)对大肠杆菌基因敲除,但是几次尝试没有成功,电击后,用氯霉素板筛,长出单克隆,但是再用氯霉素(25ug/ml)过夜后菌没有长出,用打靶片段为1200bp左右,PCR跑电泳后分子量是没有问题的,PKD46转化也没有问题,诱导阿拉伯糖浓度为10mM,1h,现在怀疑可能是电击出现问题,用的是Bio-Red电击仪器,(2.5kV,25uF,200Ω)。希望各位大侠帮帮我,已经做了很久了!

最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 8066

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