【理论探讨】请教有关caspase3和凋亡的问题
我做的课题总体思路是这样的:
A药干预后,TUNEL染色发现小鼠脑组织(皮层)凋亡减轻,于是做了关于凋亡的指标--Bax,Bcl2,caspase3,PCR和western blot结果都显示Bax,caspase3下调,Bcl2上调。
问题1:我做的是总的caspase3而不是cleaved caspase3(激活型caspase3)可不可以,是不是现在国际上做凋亡都认可cleaved caspase3?
问题2:我的实验发现caspase3下调,那么按理论来说cleaved caspase3的趋势是怎样的?我现在不明白cleaved caspase3与caspase3的关系,比如在细胞受损伤后(如缺血),出现了大量细胞凋亡,caspase3表达增加,那么实验所检测到的caspase3都是激活型的caspase3吗?会不会是caspase3里面有一部分是激活型的caspase3,有一部分是无活性的caspase3呢?
问题3:假如只做Bax,Bcl2这2个指标,删掉caspase3,对凋亡的说服力足够吗?
请各位指点,非常感谢!