【求助】SD大鼠血浆microRNA定量检测
发布于 2013-07-07 · 浏览 451 · IP 江苏江苏
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各位前辈，我想检测SD大鼠心肌梗死后血浆某一microRNA的变化，用凯杰Mini Kit提取的，用20微升RNase free 水溶解，但是浓度只有10-20纳克/微升，A260/280只有1.5左右，逆转录后测cDNAN浓度大概有500-600纳克/微升，然后按照凯杰SYBR Green PCR Kit试剂盒上限上样量3纳克上样，结果Ct值通常超过35，或者是检测不到，而且内参u6空白孔也能检测出值，荧光阈值每次都不一样，结果也很不稳定，重复性比较差。因此我就增加增加模版量到50ng以保证ct值在30以前，不知这样结果是否还准确？
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 451
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