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【求助】qRT-PCR时目的基因CT值相差不大,但内参基因CT值差别很大

发布于 2013-04-18 · 浏览 1.8 万 · IP 未知未知
这个帖子发布于 12 年零 18 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
小弟最近在用qRT-PCR法测肺鳞癌组织和癌旁组织中某几个基因表达情况,选的是GAPDH为内参基因,检测出目的基因的CT值有一定差别,但GAPDH CT值肿瘤组织比癌旁组织小很多,大多都小3-4以上,这样测出来结果就都变成了目的基因在癌旁组织中远高于肿瘤组织中了。
小弟反复测了好几次,结果都类似。小弟也选取了8对肿瘤组织和癌旁组织样本,用ABI公司的试剂盒和软件测了十几个常见的内参基因,用分析这些基因表达的一致性,结果GAPDH评分位于第四位。
小弟用的是Taqman法,目的基因和GAPDH CT值都在20-30之间。
小弟想问下,这结果可靠吗?是什么原因引起的?该怎么改进?
不胜感激!



最后编辑于 2013-04-18 · 浏览 1.8 万

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