【求助】质粒诱导蛋白，突然诱导不出来了，求大虾指导

我的载体是PGex-4T-1，gst标签，前阵子能很好的表达蛋白，突然有一次不表达了，从那以后也再也表达不出来了。我试过很多方法，复壮，提质粒重新转化，而且转过好几种菌，都不表达，后来又重新构建，还是不表达，去送过测序。序列是正确的。
有哪位好人给帮帮忙，说下原因呗，我都搞了两三个月了都没提出来，急 啊！！！！