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【求助】慢病毒感染不上悬浮细胞怎么办

医师 · 发布于 2012-05-30 · IP 天津天津
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这个帖子发布于 13 年零 180 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

我的靶细胞是NB4或HL60悬浮细胞,载体是慢病毒载体pSicoR-GFP改造的,病毒包装用的是磷酸钙法,插入载体的目的片段大约3kb左右,感染时polybrane浓度是8ug/ml,感染后1500rpm离心90分钟,感染效率很低,48小时后流式分GFP比例才1%左右,五六天之后绿色荧光基本上消失。做过空载体的对照,空载体包装出的病毒感染效率能达到80%--90%以上,我觉得系统本身是没问题的。在载体的改造过程中切掉了5‘loxp位点,不知道是否对感染靶细胞的效率有影响。不知道问题到底出在哪里,请大家帮帮忙,如何提高感染效率。

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