【原创】细胞氧化应激检测
发布于 2012-05-21 · 浏览 1.2 万 · IP 重庆重庆
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美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为您提供完备的细胞氧化应激分析解决方案，其产品包含蛋白质羰基化、硝基化损伤及晚期氧化蛋白产物（AOPP）分析，脂质过氧化的标志物壬 烯(HNE)和丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a快速检测试剂盒，核酸DNA/RNA的常规损伤分析如8-OHdG/8-OHG和AP位点检测， 还包括细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析试剂盒；除此之外，还有多种抗氧化物的活性检测方案供您选择，如过氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶 （CAT）及ORAC指标（氧基抗氧化能力）和HORAC指标（羟基抗氧化能力）等。
蛋白质氧化损伤分析（Assay for Oxidative Protein Damage）
在氧化应激过程中，自由基对蛋白质的作用包括蛋白质肽链断裂、蛋白质分子相互间交联聚合、蛋白质氨基酸发生氧化脱氨反应、氧自由基攻击蛋白质还原性基团、脂类氧化裂解所产生的丙二醛与蛋白质上的氨基产生分子间的交联等。目前对于蛋白质氧化损伤的检测指标主要有两个，分别是蛋白羰基生成（羰基化）和二 酪氨酸的生成（蛋白质中酪氨酸硝基化）。
CellBioLabs为您提供完整的蛋白质氧化损伤检测方案，其OxiSelect? Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质糖基化分析试剂盒）专门用于快速检测蛋白质发生氧化应激后，其羰基化程度；OxiSelect? Protein Nitration (Nitrotyrosine)Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒）为检测细胞内蛋白质是否发生硝基化反应提供了便捷的解决方案；而OxiSelect? AOPP Assay Kits（晚期氧化蛋白产物分析试剂盒）则能快速的检测蛋白氧化后的损伤后果。
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| | | 蛋白质羰基化氧化损伤ELISA分析试剂盒，96孔板分析 |
| | | 蛋白质羰基化氧化损伤分光光度计检测试剂盒,40次分析 |
| | | 蛋白质羰基化氧化损伤免疫印迹/ECL显色分析,10次 |
| | | 蛋白质羰基化氧化损伤免疫印迹/ECL显色对照 |
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| | | 蛋白质硝基化（二酪氨酸）氧化损伤ELISA分析，96孔板 |
| | | 蛋白质硝基化（二酪氨酸）氧化损伤免疫印迹/ECL显色分析，10次 |
| | | 蛋白质硝基化（二酪氨酸）氧化损伤免疫印迹/ECL对照 |
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脂质过氧化分析（Assay for Lipid Peroxidation）
脂质过氧化现象在动物和植物中都会发生，并且已经被用作细胞和组织氧化应激下的反应标志物。脂质过氧化为ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应，形成脂质 过氧化产物(lipid peroxide, LPO)如丙二醛 (MDA)和4-羟基壬烯醛(HNE)，从而使细胞膜的流动性和通透性发生改变,最终导致细胞结构和功能的改变。4-羟基壬烯醛(HNE)和丙二醛 (MDA)是两个强毒力的脂质过氧化终产物,常常是作为判断脂质过氧化的指标。
西美杰向您推荐美国著名细胞试剂专家Cell BioLabs的细胞氧化压力检测全套方案，该方案中包括的脂质过氧化分析检测试剂除包括经典的脂质过氧化指标4-羟基壬烯醛(HNE)和丙二醛(MDA)的快速ELISA检测和基于TBRS（硫代巴比妥酸反应物）的MDA定量分析，还有在动脉粥样化形成、风湿性关节炎以及癌变的过程中脂质过氧化 重要检测指标8-异前列腺素F2a的ELISA分析试剂盒。
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| | | 脂质过氧化指标指标4-羟基壬烯醛(HNE)ELISA试剂盒，96孔板分析 |
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| | | 脂质过氧化重要检测指标8-异前列腺素F2a的ELISA分析试剂盒，96孔板分析 |
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| | | 基于硫代巴比妥酸与MDA以2：1的比例形成络合物的分析，小于30min，样品需求量少，无需试管等器材、荧光分析仪或ELISA获取数据 |
| | | 比TBRS更直接和准确的检测方案，使用MDA抗体进行免疫反应（包括免疫印迹和ELISA两种检测手段） |
TBARS分析及丙二醛定量分析——脂质过氧化检测
脂质过氧化是氧应激增强后发生的ROS氧化生物膜的过程，即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成脂质过氧化产物(lipid peroxide, LPO)，如丙二醛 (malonaldehyde,MDA)和4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonenal,HNE)，其中MDA是脂质过氧化，也是细胞氧化损伤的一个重要检测指标。
针对MDA的水平检测，以硫代巴比妥酸(TBA)方法测得的所谓丙二醛(MDA)水平已被广泛用作诊断组织伤害和脂过氧化程度的指标。但TBA方法对MDA的特异性很有争议，MDA只是氧化伤害和脂质过氧化产生的诸多不饱和醛酮产物中主要产物的一种。而硫代巴比妥酸反应产物(Thiobarbituric Acid Reactive Substances, TBARS)则涵盖 了大部分氧化伤害产生的醛酮类物质，因而TBARS可被用作为衡量脂质过氧化一个更好的指标。TBARS分析提供了在疾病状态下分析自由基活性的相关水平，并能检测很多抗氧化物的特性。
OxiSelect? TBARS（硫代巴比妥酸反应物）Assay Kit (MDA Quantitation)（货号：STA-330）通过硫代巴比妥酸与MDA以2：1的比例形成络合物，通过测量络合物的量来检测脂质过氧化的水平。该分析试剂，首先包含有MDA的待测样品和MDA标准样与TBA在95孵育反应，反应后产物经过分光光度计和荧光计获得数据，通过与标准样所做的标准曲线做比较，获得待测样中的MDA含量。采用该TBARS的MDA定量分析试剂只需要30分钟，并且样品需求量很少，无需试管等器材，简单快捷，可完成200次分析。
除了TBARS分析，针对MDA的检测，CellBiolabs还提供了比OxiSelect? TBARS更直接的定量MDA的脂质过氧化检测方案，即OxiSelect? MDA Assays（货号：STA-331<Imunoblot>/STA-332<Colorimetric>）。该MDA分析试剂采用免疫学方法（包括ELISA的快速检测和Western Bloting的定量检测）更直接的检测MDA-蛋白质加合物的含量，试剂盒内均提供阳性对照，比TBARS的检测更准确直接。其中ELISA检测方案可进行96次分析，WB检测方案可进行10次。
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| | | 传统生化底物法检测，200次分析 |
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| | | 免疫印迹法检测，10次分析 |
| | | ELISA比色法检测，96次分析 |
| | | 100?g，ELISA比色法标准物对照 |
活性氧(ROS)自由基可以直接攻击生物大分子DNA/RNA诱发DNA/RNA氧化损伤。在各种氧化损伤中，以鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟 基-[脱氧]鸟嘌呤(8-OHdG/8-OHG)最为常见。还有一些嘌呤或者嘧啶碱基直接脱去的反应，这样也就形成了核酸中无嘌呤（apurinic）和 脱嘧啶（apyrimidinic）位点，统简称AP位点。除了上述氧化损伤外，DNA双链断裂（DSBs）是细胞内多种类型的DNA损伤中最危险、最严 重的一种。
OxiSelect?Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits (8-OHdG or 8-OHG Quantitation)提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案，而OxiSelect? Oxidative DNA Damage QuantitationKit (AP Sites)则专门为AP位点的高灵敏检测而定制，可用于细胞、组织等来源的基因组样品。针对于DNA双链断裂的检测，OxiSelect? DNA Double-Strand Break Assay则可以让用户能在3小时内在荧光显微镜下观察到DNA断裂的实验结果。
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| | | DNA氧化过程中鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟基-[脱氧]鸟嘌呤(8-OHdG)定量，96孔板分析 |
| | | RNA氧化过程中鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟基-鸟嘌呤(8-OHG)定量，96孔板分析 |
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| | | DNA氧化损伤过程中导致嘌呤或者嘧啶碱基脱去的位点，即无嘌呤和无嘧啶AP位点定量，50次分析 |
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| | | 通过免疫方法检测DNA双链断裂后的产物H2AX的量以分析DNA双链断裂状况，100次分析 |
彗星实验（Comet Assay）是近年发展起来的在单细胞水平上定量检测DNA损伤的灵敏方法。经过不断改进和完善,用该方法检验的基因损伤已成为鉴别遗传毒性物质的敏感标 记物,在致癌作用机制、环境污染监测评价等研究中，均发挥了重要作用。但是传统的实验室方法步骤繁琐，需要单独配置裂解试剂，需要提前对样品DNA进行处 理，且每次检测样品有限，染色过程中需要EB等致癌染料。
OxiSelect?Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)彗星分析克服了上述障碍，可以一次进行多个样品的处理，解决了由于处理时间不同而导致的实验结果差异；并且使用一站式试剂盒，简单快捷，直接使用细胞进行实验；另外在检测时，也可以试验结果可以直接在免疫荧光显微镜下观察。
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| | | 多种分析样式供您选择，请联系我们问询 |
| | | 多种分析样式供您选择，请联系我们问询 |
活性氧自由基和抗氧化剂分析（Assays for Reactive Oxygen Species and Antioxidants）
需氧细胞在代谢过程中产生一系列活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)，细胞内存在各种活性酶及抗氧化剂以维持氧化和抗氧化的平衡，这其中多种氧自由基酶类发挥了重要的作用。SOD（过氧化物歧化酶）主要存在于胞液和线粒体基质中，是防御生物体氧化损伤的一种十分重要的酶。它的作用底物是超氧阴离子自由基O2-·，可将其催化歧化为氧气和过氧化氢。CAT（过氧化氢酶）是过氧化物酶体的标志酶,存在于红细胞及某些组织内的过氧化体中，它的主要作用就是催化H2O2分解为H2O与O2，使得H2O2不致于与O2在铁螯合物作用下反应生成非常有害的-OH。
OxiSelect? SuperoxideDismutase Activity Assay（过氧化物歧化酶活性分析）和OxiSelect? Catalase Activity Assay Kit（过氧化氢酶活性分析）试剂盒为氧化应激研究中，细胞内两种重要的过氧化物酶的检测提供了快捷的检测方案。
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| | | ELISA检测过氧化物歧化酶活性，简单快捷，包括阳性对照，可做100次分析 |
| | | 过氧化氢酶ELISA活性检测，只需30分钟，包括阳性对照，可做96次分析 |
| | | 2小时内完成相应氧基抗氧化能力的检测，并能通过荧光分析仪读取数据 |
| | | 2小时内完成相应羟基抗氧化能力的检测，并能通过荧光分析仪读取数据 |
另外，在细胞分子水平上检测细胞内生物大分子的抗氧化能力，可由ORAC指标（氧基抗氧化能力）和HORAC指标（羟基抗氧化能力）反应出来。 OxiSelect? ORAC and HORAC Activity Assay Kits试剂盒能在2小时内完成相应活力的检测，并能通过荧光分析仪读取数据。
蛋白质氧化损伤检测
氧化应激（氧化压力）是当生物体内活性氧的生成与清除平衡状态被破坏后而导致氧自由基（ROS）增加的过程。当各种因素打破这一平衡而导致活性氧浓度超过生理限度时就会损伤生物大分子，包括脂质过氧化、DNA的氧化损伤、蛋白质的氧化和单糖氧化等。
其中自由基对蛋白质的作用包括蛋白质肽链断裂、蛋白质分子相互间交联聚合、蛋白质氨基酸发生氧化脱氨反应、氧自由基攻击蛋白质还原性基团、脂类氧化裂解所产生的丙二醛与蛋白质上的氨基产生分子间的交联等。目前对于蛋白质氧化损伤的检测指标主要有两个，分别是蛋白羰基生成（羰基化）和二酪氨酸的生成（蛋白质中酪氨酸硝基化）。Cell BioLabs为您提供完整的蛋白质氧化损伤检测方案，其OxiSelect? Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质羰基化分析试剂盒）专门用于快速检测蛋白质发生氧化应激后，其羰基化程度；OxiSelect? Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒）为检测细胞内蛋白质是否发生硝基化反应提供了便捷的解决方案；而OxiSelect?AOPP Assay Kits（晚期氧化蛋白产物分析试剂盒）则能快速的检测蛋白氧化后的损伤后果。
蛋白质氧化羰基化分析——CellBioLabs蛋白氧化损伤试剂盒
自由基对蛋白质的作用包括蛋白质肽链断裂、蛋白质分子相互间交联聚合、蛋白质氨基酸发生氧化脱氨反应、氧自由基攻击蛋白质还原性基团、脂类氧化裂解所产生的丙二醛与蛋白质上的氨基产生分子间的交联等。目前对于蛋白质氧化损伤的检测指标主要有两个，分别是蛋白羰基生成（羰基化）和二酪氨酸的生成（蛋白质中酪氨酸硝基化）。Cell BioLabs为您提供完整的蛋白质氧化损伤检测方案，其OxiSelect? Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质羰基化分析试剂盒）专门用于快速检测蛋白质发生氧化应激后，其羰基化程度；OxiSelect? Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒）为检测细胞内蛋白质是否发生硝基化反应提 供了便捷的解决方案；而OxiSelect? AOPP AssayKits（终末氧化蛋白产物分析试剂盒）则能快速的检测蛋白氧化后的损伤后果。
蛋白质羰基化是指氨基酸残基侧链中的氨基或亚氨基受到氧自由基攻击最后转变成醛基,并释放NH3的过程。其在体内的形成主要是通过金属离子催化氧化系统完成。在这个过程中，二价铁离子与蛋白质上的氨基酸残基形成铁(Ⅱ)一蛋白质配位复合物。H202作用于此配位复合物的铁(Ⅱ)上，产生·OH、OH-和铁(Ⅲ)一蛋白质配位复合物。·OH从侧链氨基酸上提出一个氢原子，使侧链氨基酸上的碳上有一个不配对电子。在此不配对电子作用下，铁(Ⅲ)一蛋白质配位复合物又重新变回铁(Ⅱ)一蛋白质配位复合物，随后配位键断开，二价铁离子和NH3与复合物分离，由此在蛋白质侧链形成羰基或羰基衍生物。蛋白质中的赖氨酸、精氨酸、脯氨酸、苏氨酸残基都有可能参与糖基化。
蛋白质氧化损伤羰基化的检测目前主要使用2，4-二硝基苯肼法。传统方法多是采用比色法，虽然操作简单但是误差很大，但不能满足精密的蛋白质糖化测定要求。Buss及其同事采用免疫反应的原理使用DNP抗体检测蛋白质羰基化程度，但是在具体的操作中，用TCA沉淀蛋白的时候会有至少20%的总蛋白损失，导致了其结果的不准确。Cell BioLabs的OxiSelect? Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质羰基化分析试剂盒）则提供了更优的选择，使用该羰基化检测试剂盒，无需蛋白浓缩沉淀从而降低了中间的损失，而且检测灵敏度也由原来的>4 mg/mL大幅提高到10 μg/mL。
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| | | 比色法检测，一次96孔板分析 |
| | 比色法检测，五次96孔板分析 | |
| | | 分光光度计法检测，40次分析 |
| | | 免疫印迹杂交、ECL显色，10次标准7.5 cm X 8.5 cm分析 |
| | | 10ug，标准曲线对照 |
OxiSelect? 蛋白质羰基化分析试剂盒为您提供多种检测方案，您可以根据您的实验要求，选择ELISA（目录号：STA-310/STA-310-5）、免疫印迹（目录号：STA-308）或者分光光度计（目录号：STA-315）检测方面中的任何一种。
蛋白质氧化硝基化Nitrotyrosine分析——蛋白氧化损伤检测
生物体内活性氧的生成与清除处于动态平衡状态，当各种因素打破这一平衡而导致活性氧浓度超过生理限度时就会损伤生物大分子，包括脂质过氧化、DNA的氧化损伤、蛋白质的氧化和单糖氧化等。活性氧对蛋白质的作用包括修饰氨基酸，使肽链断裂，形成蛋白质的交联聚合物，改变构像和免疫原性等五个方面。
目前对于蛋白质氧化损伤的检测指标主要有两个，分别是蛋白羰基生成（羰基化）和二酪氨酸的生成（蛋白质中 酪氨酸硝基化）。CellBioLabs为您提供完整的蛋白质氧化损伤检测方案，其OxiSelect? Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质羰基化分析试剂盒）专门用于快速检测蛋白质发生氧化应激后，其羰基化程度；OxiSelect? Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒）为检测细胞内蛋白质是否发生硝基化反应提供了便捷的解决方案；而OxiSelect? AOPP Assay Kits（终末氧化蛋白产物分析试剂盒）则能快速的检测蛋白氧化后的损伤后果。
NO被超氧自由基氧化成（过氧化）亚硝酸离子，能够和蛋白质中的酪氨酸残基发生反应生成3-硝基酪氨酸(Nitrotyrosine)残基，也可以作为蛋白质氧化损伤的指标。但这种指标受到蛋白质样品种类的限制。如牛血清中酪氨酸含量比较多，容易观察到3-硝基酪氨酸的生成；而铜锌超氧化物歧化酶中仅含4个酪氨酸分子，因此一般不易观察到3-硝基酪氨酸的生成。并且，3-硝基酪氨酸的生成有一定的限度。即当3-硝基酪氨酸的生成达到饱和后，继续增加氧化物浓度不再增加3-硝基酪氨酸的量。3-硝基酪氨酸的生成可以用Amado方法，采用325 nm的激发光，415 nm处发射荧光是二酪氨酸的特征。
CellBioLabs的OxiSelect? Protein Nitration (Nitrotyrosine)Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒），直接检测硝基化蛋白内3-硝基酪氨酸的含量，参照阳性对照硝基化BSA中的3-硝基酪氨酸含量的标准曲线，得到实验数值。该检测方法高效灵敏，对于3-硝基酪氨酸的含量的检测灵敏度达到20nM-8.0μM。试剂盒内包含阳性对照，可完成96次检测。另外，该蛋白质硝基化分析试剂盒为您的蛋白质氧化损伤检测提供了多样选择。您可以根据您的实验要求，选择ELISA（目录号：STA-305/STA-305-5）、免疫印迹（目录号：STA-303）检测方法中的任何一种。
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| | | ELISA比色法检测，一次96孔板分析 |
| | ELISA比色法检测，五次96孔板分析 | |
| | | 免疫印迹杂交、ECL显色，10次分析 |
| | | 10ug，标准曲线对照 |
AOPP晚期氧化蛋白产物分析（OxiSelect? AOPP AssayKits）
在尿毒症时血中存在着氧化损伤的蛋白产物，称为晚期氧化蛋白产物（Advanced oxidation protein products，AOPP）。由活性中性粒细胞产生的氧化物增多，或这些氧化物的清除减少，均可导致AOPP增加。AOPP分析为检测尿毒症时自由基的相关信息及一些化合物抗氧化性质的筛选提供了便利。Cell Biolabs为您提供的AOPP分析试剂盒（AOPP Assay Kit）提供了一种更简单、可重复和连续的系统，以检测细胞浆、细胞裂解液以及组织匀浆中AOPP的含量…点击查看更详细产品信息：“晚期氧化蛋白产物（AOPP）分析——蛋白氧化损伤检测”。
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| | | 常规方法，参照氯胺反应标准曲线比色获得最后数值，可做200次分析 |
| | | 标准对照，做标准曲线用 |
脂质过氧化分析
氧自由基反应和脂质过氧化反应在机体的新陈代谢过程中起着重要的作用，正常情况下两者处于协调与动态平衡状态，维持着体内许多生理生化反应和免疫反应。一旦这种协调与动态平衡产生紊乱与失调，就会引起一系列的新陈代谢失常和免疫功能降低，损害生物膜及其功能。
脂质过氧化过程中发生的ROS氧化生物膜的过程，即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的 侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成脂质过氧化产物(Lipid PerOxide, LPO)如丙二醛 (Malonaldehyde,MDA)和4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonenal,HNE)，从而使细胞膜的流动性和通透性发生改变,最终导致细胞结构和功能的改变。
针对脂质过氧化的检测，西美杰向您推荐Cell BioLabs完整的脂质过氧化检测方案，其OxiSelect? HNE-His Adduct ELISA Kit（4-羟基壬烯酸-His加合物ELISA检测试剂盒）专门用于快速检测细胞浆、细胞裂解液以及血清中的4-羟基壬烯酸含量；OxiSelect?8-iso-Prostaglandin F2α ELISA Kit (8-isoprostane)（8-异前列腺素F2a ELISA检测试剂盒）为尿液、胞浆等8-异前列腺素F2a含量提供了便捷的解决方案；而OxiSelect? TBARS Assay Kit (MDAQuantitation)（丙二醛TBARS定量分析试剂盒）以及OxiSelect? MDA (Malondialdehyde) Assays（传统丙二醛分析）都能快速检测脂质过氧化产物MDA的含量。
4-羟基壬烯酸（HNE）ELISA分析试剂盒——脂质过氧化检测
生物体内活性氧的生成与清除处于动态平衡状态，当各种因素打破这一平衡而导致活性氧浓度超过生理限度时就会损伤生物大分子，包括脂质过氧化、DNA的氧化损伤、蛋白质的氧化和单糖氧化等。在病理条件下,ROS产生过多或抗氧化系统活性下降,可引发脂质过氧化反应损伤细胞膜使细胞受损。脂质过氧化为氧应激增强后发生的ROS氧化生物膜的过程,即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成脂质过氧化产物(lipid peroxide, LPO)如丙二醛 (malonaldehyde,MDA)和4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonenal,HNE),从而使细胞膜的流动性和通透性发生改变,最终导致细胞结构和功能的改变。
针对脂质过氧化的检测，西美杰向您推荐Cell BioLabs完整的脂质过氧化检测方案，其OxiSelect? HNE-His Adduct ELISA Kit（4-羟基壬烯酸-His加合物ELISA检测试剂盒）专门用于快速检测细胞浆、细胞裂解液以及血清中的4-羟基壬烯酸含量；OxiSelect? 8-iso-Prostaglandin F2α ELISA Kit(8-isoprostane)（8-异前列腺素F2aELISA检测试剂盒）为尿液、胞浆等8-异前列腺素F2a含量提供了便捷的解决方案；而OxiSelect? TBARS Assay Kit (MDAQuantitation)（丙二醛TBARS定量分析试剂盒）以及OxiSelect? MDA (Malondialdehyde) Assays（丙二醛分析）都能快速检测脂质过氧化产物MDA的含量。
4-羟基壬烯酸(HNE)是两个强毒力的脂质过氧化终产物之一，常常作为判断脂质过氧化的指标。4-羟基壬烯酸(HNE)可促进Cuppfer 细胞与肝细胞释放细胞因子，并共同进一步介导肝细胞死亡、Mallory小体形成、肝星状细胞活化和肝纤维化形成。HNE还具有使中性粒细胞趋化和浸润的功能。Cell BioLabs的4-羟基壬烯酸-His加合物ELISA检测试剂盒（OxiSelect? HNE-His Adduct ELISA Kit 目录号：STA-334）为你快速测定多种样品类型的4-羟基壬烯酸(HNE)提供了便捷方案。
HNE能够通蛋白结合形成稳定的、加合物状态的晚期脂质过氧化终产物，这种被HNE修饰的蛋白质在细胞内会进一步导致被氧化蛋白在功能和结构上的改变。CellBiolabs的HNE-His加和物ELISA检测试剂盒（HNE-His Adduct ELISA Kit 目录号：STA-334）是一种基于酶免疫分析的快速、定量检测HNE-His蛋白加合物的试剂方案。试剂盒内提供HNE-BSA作为标准曲线，整个试验程序只需要4小时，能快速检测细胞裂解液、血清及胞浆样品中的HNE含量。
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| | | ELISA比色法检测，96次分析 |
| | | 100ug，标准曲线阳性对照 |
8-异前列腺素F2a（8-Isoprostane）ELISA分析——脂质过氧化检测
在病理条件下,ROS产生过多或抗氧化系统活性下降,可引发脂质过氧化反应损伤细胞膜使细胞受损。脂质过氧化为氧应激增强后发生的ROS氧化生物膜的过程，即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成脂质过氧化产物(lipid peroxide, LPO)如丙二醛 (malonaldehyde,MDA)和4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonenal,HNE)。
4-羟基壬烯酸(HNE)和丙二醛 (malonaldehyde,MDA)是判断脂质过氧化的两个重要指标，但是除此之外，8-异前列腺素F2a目前已被作为动脉粥样化形成、风湿性关节炎以及癌变的重要检测指标，并已被作为脂质过氧化的另一个重要检测指标。8-异前列腺素F2α(8-isoprostaneF2α)是经自由基催化不饱和脂肪酸脂质过氧化(非酶促反应)后的终末产物，是一个分子量为354.5的小分子脂类物质,是前列腺素F2a的异构体。OxiSelect? 8-iso-Prostaglandin F2a ELISA Kit (8-isoprostane)（目录号：STA-337）提供了8-异前列腺素F2a的ELISA检测方案。
CellBiolabs的OxiSelect? 8-iso-Prostaglandin F2a ELISA Kit(8-isoprostane)试剂盒（目录号：STA-337），通过竞争性ELISA检测胞浆、尿液、血浆以及组织提取液等多种样品内的8-iso-PGF2a含量。该试剂盒中，提供8-iso-PGF2a标准样做标准曲线，并有相应的8-iso-PGF2a抗体和竞争性8-iso-PGF2a-HRP等。样品经ELISA反应后在450 nm (最优620 nm)读取数据并参照标准曲线得出数值。该Kit足够完成96次反应，操作简捷，不到3小时就能获得结果。
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| | | ELISA比色法检测，96次分析 |
TBARS分析及丙二醛定量分析——脂质过氧化检测
脂质过氧化是氧应激增强后发生的ROS氧化生物膜的过程，即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成脂质过氧化产物(lipid peroxide, LPO)，如丙二醛 (malonaldehyde, MDA)和4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonenal,HNE)，其中MDA是脂质过氧化，也是细胞氧化损伤的一个重要检测指标。
针对MDA的水平检测，以硫代巴比妥酸(TBA)方法测得的所谓丙二醛(MDA)水平已被广泛用作诊断组织伤害和脂过氧化程度的指标。但TBA方法对MDA的特异性很有争议，MDA只是氧化伤害和脂质过氧化产生的诸多不饱和醛酮产物中主要产物的一种。而硫代巴比妥酸反应产物(Thiobarbituric Acid Reactive Substances, TBARS)则涵盖了大部分氧化伤害产生的醛酮类物质，因而TBARS可被用作为衡量脂质过氧化一个更好的指标。TBARS分析提供了在疾病状态下分析自由基活性的相关水平，并能检测很多抗氧化物的特性。
OxiSelect? TBARS（硫代巴比妥酸反应物）Assay Kit (MDA Quantitation)（货号：STA-330）通过硫代巴比妥酸与MDA以2：1的比例形成络合物，通过测量络合物的量来检测脂质过氧化的水平。该分析试剂，首先包含有MDA的待测样品和MDA标准样与TBA在95孵育反应，反应后产物经过分光光度计和荧光计获得数据，通过与标准样所做的标准曲线做比较，获得待测样中的MDA含量。采用该TBARS的MDA定量分析试剂只需要30分钟，并且样品需求量很少，无需试管等器材，简单快捷，可完成200次分析。
除了TBARS分析，针对MDA的检测，CellBiolabs还提供了比OxiSelect? TBARS更直接的定量MDA的脂质过氧化检测方案，即OxiSelect? MDA Assays（货号：STA-331<Imunoblot>/STA-332<Colorimetric>）。该MDA分析试剂采用免疫学方法（包括ELISA的快速检测和Western Bloting的定量检测）更直接的检测MDA-蛋白质加合物的含量，试剂盒内均提供阳性对照，比TBARS的检测更准确直接。其中ELISA检测方案可进行96次分析，WB检测方案可进行10次。
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| | | 传统生化底物法检测，200次分析 |
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| | | 免疫印迹法检测，10次分析 |
| | | ELISA比色法检测，96次分析 |
| | | 100?g，ELISA比色法标准物对照 |
TBARS分析及丙二醛定量分析——脂质过氧化检测
脂质过氧化是氧应激增强后发生的ROS氧化生物膜的过程，即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成脂质过氧化产物(lipid peroxide, LPO)，如丙二醛 (malonaldehyde,MDA)和4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonenal,HNE)，其中MDA是脂质过氧化，也是细胞氧化损伤的一个重要检测指标。
针对MDA的水平检测，以硫代巴比妥酸(TBA)方法测得的所谓丙二醛(MDA)水平已被广泛用作诊断组织伤害和脂过氧化程度的指标。但TBA方法对MDA的特异性很有争议，MDA只是氧化伤害和脂质过氧化产生的诸多不饱和醛酮产物中主要产物的一种。而硫代巴比妥酸反应产物(Thiobarbituric Acid Reactive Substances, TBARS)则涵盖 了大部分氧化伤害产生的醛酮类物质，因而TBARS可被用作为衡量脂质过氧化一个更好的指标。TBARS分析提供了在疾病状态下分析自由基活性的相关水平，并能检测很多抗氧化物的特性。
OxiSelect? TBARS（硫代巴比妥酸反应物）Assay Kit (MDA Quantitation)（货号：STA-330）通过硫代巴比妥酸与MDA以2：1的比例形成络合物，通过测量络合物的量来检测脂质过氧化的水平。该分析试剂，首先包含有MDA的待测样品和MDA标准样与TBA在95孵育反应，反应后产物经过分光光度计和荧光计获得数据，通过与标准样所做的标准曲线做比较，获得待测样中的MDA含量。采用该TBARS的MDA定量分析试剂只需要30分钟，并且样品需求量很少，无需试管等器材，简单快捷，可完成200次分析。
除了TBARS分析，针对MDA的检测，CellBiolabs还提供了比OxiSelect? TBARS更直接的定量MDA的脂质过氧化检测方案，即OxiSelect? MDA Assays（货号：STA-331<Imunoblot>/STA-332<Colorimetric>）。该MDA分析试剂采用免疫学方法（包括ELISA的快速检测和Western Bloting的定量检测）更直接的检测MDA-蛋白质加合物的含量，试剂盒内均提供阳性对照，比TBARS的检测更准确直接。其中ELISA检测方案可进行96次分析，WB检测方案可进行10次。
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| | | 传统生化底物法检测，200次分析 |
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| | | 免疫印迹法检测，10次分析 |
| | | ELISA比色法检测，96次分析 |
| | | 100?g，ELISA比色法标准物对照 |
DNA/RNA损伤分析
活性氧(ROS)自由基可以直接攻击生物大分子DNA/RNA诱发DNA/RNA损伤。由超氧阴离子和过氧化氢通过Fenton反应产生的羟自由基在DNA中产生多重修饰。羟自由基对脱氧核糖基团的氧化攻击将导致DNA释放自由碱基，产生链断裂、各种糖修饰以及单个无碱基位点（AP位点）。DNA / RNA分子的损伤类型有多种。
针对DNA/RNA损伤的检测，西美杰向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA氧化损伤检测方案，其OxiSelect? Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits（8-OHdG or 8-OHGQuantitation）提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案；OxiSelect? Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)则为您提供多种选择的彗星分析产品；针对DNA损伤中的AP位点检测，Cell Biolabs的OxiSelect? Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)则使用经典的ARP检测方案；DNA双链断裂分析为您提供了快捷的DSB分析试剂。
8-羟基-(脱氧)鸟嘌呤定量ELISA分析——DNA/RNA损伤分析
活性氧(ROS)自由基可以直接攻击生物大分子DNA/RNA诱发DNA/RNA氧化损伤。DNA分子的损伤类型有多种。UV照射后DNA分子上的两个相邻的胸腺嘧啶 (T)或胞嘧啶(C)之间可以共价键连结形成环丁酰环，这种环式结构称为二聚体。DNA 分子还可以发生个别碱基或核苷酸的变化。例如碱基结构类似物5-溴尿嘧啶等可以取代个别碱基等。
针对DNA/RNA损伤的检测，西美杰向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA氧化损伤检测方案，其OxiSelect? Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits（8-OHdG or 8-OHGQuantitation）提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案；OxiSelect? Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)则为您提供多种选择的彗星分析产品；针对DNA损伤中的AP位点检测，Cell Biolabs的OxiSelect? Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)则使用经典的ARP检测方案；DNA双链断裂分析为您提供了快捷的DSB分析试剂。
在各种氧化损伤中，以鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟基-[脱氧]鸟嘌呤(8-OHdG/8-OHG)最为常见。还有一些嘌呤或者嘧啶碱基直接脱去的反应，这样也就形成了核酸中无嘌呤（apurinic）和脱嘧啶（apyrimidinic）位点，统简称AP位点。除了上述氧化损伤外，DNA双链断裂（DSBs）是细胞内多种类型的DNA损伤中最危险、最严重的一种。西美杰向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA损伤检测方案，其产品覆盖上述最重要的DNA/RNA损伤分析产品，为您提供最优的检测方案。
其中OxiSelect? Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits（8-OHdG or 8-OHGQuantitation）提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案。在各种氧化损伤中，以鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟基-脱氧鸟嘌呤（8-OHdG）最为常见8-羟基-脱氧鸟嘌呤（8-OHdG）因此也成为DNA损伤最普遍的标志物。作为DNA损伤的副产物，当有化学致癌物刺激时，会产生更多的8-OHdG。在生物体内核酸外切酶修复损伤DNA时，形成的8-羟基-脱氧鸟嘌呤会被分泌出去而不会进行尿液中进行进一步的代谢。同样的情况也在RNA中发生，只不过是由鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟基-鸟嘌呤（8-OHG），其也被作为RNA损伤的重要检测指标。
Cell Biolabs的OxiSelect? OxidativeDNA / RNA Damage ELISA Kits试剂盒采用竞争性ELISA方法定量8-OHdG/8-OHG。待测样品和8-OHdG/8-OHG标准样分别加入8-OHdG/8-OHG-BSA联结的EIA板内，孵育一段时间后，加入anti-8-OHdG/anti-8-OHG单抗，然后加入HRP联结的二抗，通过与8-OHdG/8-OHG标准曲线比对获得最终数据。该试剂盒检测灵敏，能有效检测样品中100pg/ml的8-OHdG或300pg/ml的8-OHG含量，每个试剂盒能完成至少96次分析。
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| | | ELISA比色法检测，96次分析 |
| | ELISA比色法检测，5×96次分析 | |
| | | ELISA比色法检测，96次分析 |
| | ELISA比色法检测，5×96次分析 |
彗星分析法（单细胞凝胶电泳）——DNA/RNA损伤分析
人体每天暴露在大量的化学物质当中，为了诊测这些物质对人体DNA的影响，科学家们发明了多种测定方法，然而，多年来人们所使用的这些测试方法却不能准确与快速的辨识出会使人体致癌的物质。为了解决这些问题，单细胞凝胶电泳法（Single Cell Gel Assay）应运而生，通常亦称之彗星分析法（Comet Assay）。
针对DNA/RNA损伤的检测，西美杰向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA氧化损伤检测方案，其OxiSelect? Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits（8-OHdG or 8-OHGQuantitation）提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案；OxiSelect? Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)则为您提供多种选择的彗星分析产品；针对DNA损伤中的AP位点检测，Cell Biolabs的OxiSelect? Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)则使用经典的ARP检测方案；DNA双链断裂分析为您提供了快捷的DSB分析试剂。
它之所以称为彗星分析法是因为被破坏的DNA形似彗星，此方法已被证实是最具敏感性又最具快速性的方法。研究人员使用这种方法可在24小时内获得初步结果，在十天之内能得到结论性的证据。作为单细胞水平上定量检测DNA损伤的灵敏方法，经过不断改进和完善,用该方法检验的基因损伤已成为鉴别遗传毒性物质的敏感标记物,在 致癌作用机制、环境污染监测评价等研究中，均发挥了重要作用。
彗星分析法是用来判别某种物质是否是致癌物，并衡量其对人体DNA修补的影响程度，这一分析过程是将健康的人体白血球接触于被测试的物质后，然后再用彗星分析法来进行测试，如果被测试的物质是致癌物质，那么DNA将被破坏，而被损坏的DNA将开始游离细胞核，形成彗星形状。
传统的实验室方法步骤繁琐，需要单独配置裂解试剂，需要提前对样品DNA进行处理，且每次检测样品有限，染色过程中需要EB等致癌染料。OxiSelect? Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)克服了上述障碍， 可以一次进行多个样品的处理，解决了由于处理时间不同而导致的实验结果差异；本Kit提供彗星分析所需的完整试剂，并有3孔板或96孔板样式的载玻片，将处理过的样品点样到该载玻片上后，进行电泳，之后用试剂盒内提供的荧光染料观察彗星分析结果。并且使用一站式试剂盒，简单快捷，直接使用细胞进行实验。
通过OxiSelect?彗星分析试剂盒的观察结果，DNA受到致癌物质的损坏愈大，DNA碎段就愈多，愈小的DNA碎段游离的速度就愈快，也游离愈远，因而形成了彗星的尾部，而较大的一些碎段位置则靠近细胞核，因而形成彗星的头部。DNA碎段的游动的程度不同 使它呈现出彗星状，使研究人员能很容易看清细胞的损害程，彗星的长度与DNA的损害程度有关，此长度是指从细胞核到彗星尾端的距离，也就是说，彗星尾端愈长，细胞的损害程度愈大。
Cell Biolabs的OxiSelect? CometAssays (Single Cell Gel Electrophoresis)试剂盒提供多种样式供您选择，有3孔板（货号：STA-350/351/351-5）和96孔板（货号：STA-355/355-5）不同样式。其中OxiSelect? Comet AssayKit中，包含彗星分析载玻片、彗星分析用琼脂糖以及其它试剂；另外Cell Biolabs根据您的实验要求，还单独提供彗星分析载玻片，也根据3孔板样式和96孔板样式分为多种样式（货号：STA-352/353/353-5/SAT-356/STA-356-5）。每种彗星分析样式均有多种包装供您选择。另外，还提供单独的彗星分析阳性和阴性细胞作为您的试验对照（货号：STA-354）。
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| | | 多种分析样式供您选择，请联系我们问询 |
| | | 多种分析样式供您选择，请联系我们问询 |
DNA断裂定量分析（AP位点）——DNA/RNA损伤分析
DNA的氧化损伤是由于DNA与活性氧（ROS）尤其是羟自由基之间的相互作用造成的。由超氧阴离子和过氧化氢通过Fenton反应产生的羟自由基在DNA中产生多重修饰。羟自由基对脱氧核糖基团的氧化攻击将导致DNA释放自由碱基，产生链断裂、各种糖修饰以及单个无碱基位点（AP位点）。事实上，AP位点（AP Sites）是由ROS产生的损伤的主要类型。据估计，每个哺乳动物细胞，每天能产生50,000到200,000个AP位点，这些不能及时修复的AP位点会进一步抑制拓扑异构酶活性、DNA的复制以及转录等功能，并导致基因的癌变。
针对DNA/RNA损伤的检测，西美杰向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA氧化损伤检测方案，其OxiSelect? Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits（8-OHdG or 8-OHGQuantitation）提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案；OxiSelect? Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)则为您提供多种选择的彗星分析产品；针对DNA损伤中的AP位点检测，CellBiolabs的OxiSelect? Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)则使用经典的ARP检测方案；DNA双链断裂分析为您提供了快捷的DSB分析试剂。
这些细胞在氧化损伤中发生的DNA嘌呤或者嘧啶碱基直接脱去的反应，并形成核酸中无嘌呤（apurinic）和脱嘧啶（apyrimidinic）位点，统简称AP位点。OxiSelect? Oxidative DNA Damage QuantitationKit (AP Sites)（货号：STA-324）则专门为AP位点的高灵敏检测而定制，可用于细胞、组织等多种来源的基因组样品。
由于醛反应性探针（ARP；N’-氨氧甲基羰肼基-D-生物素）特异性地与AP位点的开环上的醛基反应。通过这个反应可以检测到导致醛基形成的DNA修饰。Cell Biolabs的OxiSelect? Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)用过量ARP试剂反应后，DNA上的所有AP位点均用生物素做了标签。可以用亲和素-生物素法，用连接到亲和素上的过氧化物酶或碱性磷酸酶做比色法检测来对这些带有生物素标签的AP位点进行计数。该DNA断裂定量试剂盒（AP位点）包含用于检测每1×10e5个碱基对中4到40个AP位点的所有必需溶液，试剂盒内包括标准对照，针对96孔板分析，能完成至少50次检测。
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| | | 通过酶联反应检测，50次分析 |
DNA双链断裂（DSBs）分析及检测——DNA/RNA损伤分析系列
DNA作为细胞生命活动最重要的遗传物质，保持其分子结构的完整性和稳定性对于细胞的存活和正常生理功能的发挥具有重要意义。包括电离辐射、化疗药物及细胞代谢产物在内的多种外源和内源性因素都能引起不同形式的DNA损伤，其中DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)作为最严重的DNA损伤形式,使细胞正常生命活动的维持乃至生存都受到了严重威胁。同时,细胞也建立了一套复杂而精确的调控机制来应对这些损伤,包括激活细胞周期检查点(checkpoint)、启动修复系统及诱导细胞凋亡等。
针对DNA/RNA损伤的检测，西美杰向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA氧化损伤检测方案，其OxiSelect? Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits（8-OHdG or 8-OHGQuantitation）提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案；OxiSelect? Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)则为您提供多种选择的彗星分析产品；针对DNA损伤中的AP位点检测，Cell Biolabs的OxiSelect? Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)则使用经典的ARP检测方案；DNA双链断裂分析为您提供了快捷的DSB分析试剂。
细胞在电离辐射或其他因素作用下直接诱导或是通过复制压力诱导形成的双链断裂 (DSBs)，以及细胞自身调控的 程序性DSBs和逆转录病毒转染细胞过程中产生的DSBs均可诱导H2AX的磷酸化和簇集。DNA发生双链断裂后最早反应之一是位于断裂点附近的组蛋白H2AX的C末端第139位丝氨酸残基被快速磷酸化形成γ-H2AX。磷酸化的γ-H2AX快速转导DNA损伤信号，导致下游分子磷酸化的激活，引发一系列的生物级联反应和和细胞学反应。γ-H2AX是迄今所研究的最重要的DNA损伤感应分子，也成为目前国内外研究细胞DNA损伤应激反应的热点之一。
CellBiolabs的OxiSelect? DNA Double Strand Break Assay（DNA双链断裂分析试剂盒）（货号：STA-321）采用免疫学方法，使用DNA双链断裂的标志物γ-H2AX抗体检测DNA损伤后其表达情况。试剂盒内提供Anti-Phospho-Histone H2A.X(Ser 139) Antibody (100X)一抗以相应二抗，并有DSB诱导物作为试验阳性对照，实验简单快捷，只需3小时，就能通过荧光显色观察结果。能为96孔板样提供100次分析。
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| | | 免疫荧光法检测，100次分析 |
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1.2 万
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