【求助】花了6个月构建的重组质粒现在测序结果表示质粒构建失败?
我是一个初进实验室的研究生, 花了6个月时间构建了以pEGFP-N1为载体的重组质粒,送到上海英骏公司测序,测双向。第一次没测出来,我要求加测一次,很高兴有结果了。把测序结果和我的目的基因拿到BLAST上比对,有99%的相似度,但是仍然有5个碱基发生了突变。现在很茫然啊,是否这说明我的质粒构建失败了?是否要重新扩基因重新构建质粒,时间很紧迫,希望各位老师指点,谢谢!!
我是一个初进实验室的研究生, 花了6个月时间构建了以pEGFP-N1为载体的重组质粒,送到上海英骏公司测序,测双向。第一次没测出来,我要求加测一次,很高兴有结果了。把测序结果和我的目的基因拿到BLAST上比对,有99%的相似度,但是仍然有5个碱基发生了突变。现在很茫然啊,是否这说明我的质粒构建失败了?是否要重新扩基因重新构建质粒,时间很紧迫,希望各位老师指点,谢谢!!