【求助】裸鼠负瘤的痛苦：786-0细胞
发布于 2011-01-04 · 浏览 1493 · IP 广东广东
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我最近在做786-0细胞成瘤的实验，再接种之前这种细胞经过了射线筛选，对放疗相对抗拒，我的实验做法是这样的，请各位大侠分析下失败的原因。
待细胞长到培养瓶（75cm2）80%-90%的时候消化细胞，胰酶选择的是含EDTA的，消化时我都是在显微镜底下看到细胞大部分变园之后，再用培养液终止（10%血清），消化时间大约2-3分钟。然后计数，记的的细胞数量总数为3×107（3瓶），后离心细胞，除去上清后加入生理盐水（科室给人注射用的）悬浮细胞后，注射老鼠，每只老鼠注射量约1×107，老鼠周龄为8—10周（第一次注射细胞未成瘤，这是第二次注射），每只老鼠注射的液体量约200-300u。
注射2天多，看到老鼠背部有鼓包，5天时见到结节，色白，第六天时死亡两只老鼠，死亡前无任何征兆，尸体未见消瘦伤痕。第9天死亡一只老鼠，死亡方式同上。现在仅存一只老鼠，今日（11日）见肿瘤仍色白，可能无法存活。现在老鼠面部及体部见白毛，实验室老师说是老化的象征，离死亡不远了。
大家帮忙分析下，是不是放疗筛选后导致不成瘤。可有人做过是可以成瘤的（国外）
我的操作过程有没有失误。
老鼠死亡原因是什么（动物中心SPF，有没有可能是脱水引起）
8-10周龄会不会影像老鼠成瘤啊？
拜托大家了！
待细胞长到培养瓶（75cm2）80%-90%的时候消化细胞，胰酶选择的是含EDTA的，消化时我都是在显微镜底下看到细胞大部分变园之后，再用培养液终止（10%血清），消化时间大约2-3分钟。然后计数，记的的细胞数量总数为3×107（3瓶），后离心细胞，除去上清后加入生理盐水（科室给人注射用的）悬浮细胞后，注射老鼠，每只老鼠注射量约1×107，老鼠周龄为8—10周（第一次注射细胞未成瘤，这是第二次注射），每只老鼠注射的液体量约200-300u。
注射2天多，看到老鼠背部有鼓包，5天时见到结节，色白，第六天时死亡两只老鼠，死亡前无任何征兆，尸体未见消瘦伤痕。第9天死亡一只老鼠，死亡方式同上。现在仅存一只老鼠，今日（11日）见肿瘤仍色白，可能无法存活。现在老鼠面部及体部见白毛，实验室老师说是老化的象征，离死亡不远了。
大家帮忙分析下，是不是放疗筛选后导致不成瘤。可有人做过是可以成瘤的（国外）
我的操作过程有没有失误。
老鼠死亡原因是什么（动物中心SPF，有没有可能是脱水引起）
8-10周龄会不会影像老鼠成瘤啊？
拜托大家了！
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1493
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