【原创】甲基化MSP流程结果
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大家好！我做的是结直肠癌组织和癌旁组织某基因的MSP，具体流程如下：
Ⅰ
1) 4ug DNA in 15ul TE
2) 加入1.65ul 3M NaOH (一个月内新鲜配制)，37°C水浴15分钟
Ⅱ 亚硫酸盐反应
1） 称取1.82g偏亚硫酸钠，加入2.8ml H2O 和430ul 3M NaOH,轻柔颠倒混匀使其溶解，加入210ul 10mM氢醌，检测pH值5.0-5.2，总体积为4ml
2） 加入333ul 1）液至DNA溶液中，移液器混匀
3） 避光55°C 4h(加热至99°C 3min/every hour, 如帽盖有液体轻弹)
用QIAGEN公司试剂盒纯化回收，6)洗脱DNA溶解于80ulTE -20°C保存
Ⅰ
1) 4ug DNA in 15ul TE
2) 加入1.65ul 3M NaOH (一个月内新鲜配制)，37°C水浴15分钟
Ⅱ 亚硫酸盐反应
1） 称取1.82g偏亚硫酸钠，加入2.8ml H2O 和430ul 3M NaOH,轻柔颠倒混匀使其溶解，加入210ul 10mM氢醌，检测pH值5.0-5.2，总体积为4ml
2） 加入333ul 1）液至DNA溶液中，移液器混匀
3） 避光55°C 4h(加热至99°C 3min/every hour, 如帽盖有液体轻弹)
用QIAGEN公司试剂盒纯化回收，6)洗脱DNA溶解于80ulTE -20°C保存
