【求助】紧急求助LPS的配制与保存方法
LPS可溶于水中(5 mg/ml),或是细胞培养基中(1 mg/ml)。LPS分子在任何溶液中都会形成微粒。溶于水中或是磷酸盐缓冲液中形成混悬液。在有机溶剂也是一种混悬液。
细胞培养时,将LPS溶于装有1 ml无菌平衡盐溶液或是细胞培养基的小管中,轻轻摇晃直至其完全溶解。再加入无菌平衡盐溶液或是培养基直至配成工作浓度的母液。
1 mg/ml浓度的溶液可在2-8℃中稳定保存1月左右,分装后于-20℃中可保存2年。反复冻融可致溶液不稳定。溶液应保存在硅烷化的器皿中,因为LPS易与塑料或是玻璃结合,特别在浓度<0.1 mg/ml时。如果LPS的浓度>1 mg/ml,那么器皿壁上结合的药物可以忽略不计。如果使用玻璃器皿,那么应使溶液涡旋至少30分钟以使溶液重悬。
由上面可知,LPS可直接配制到无菌的缓冲液中,无须过滤。因为是混悬液,所以使用之前应使之充分重悬。
另外也有人说要过滤,所以还请问这样配制到底要不要过滤,还有LPS粉末的确是不好溶解的,用PBS液要使劲震荡才能溶解。我还要配5mg/ml LPS液,就是将10mg粉末完全溶解到2ml PBS液中,这样子2ml要是过滤的话会不会就把许多悬浮颗粒过滤没了?