【求助】分离小鼠内皮细胞,染色的问题!
我现在用磁珠分离小鼠内皮细胞,然后上流式检测。方法如下:
1.分离细胞:
a. 分离获得 肝细胞悬液;
b. 肝细胞悬液与Biotin-anti CD105 Ab孵育;
c. 与streptavidin-mcrobeads 磁珠孵育;
d. 阳性获得CD105+的细胞;
2.流式检测:
a. CD105+的细胞与Boitin- Anti CD105 Ab 孵育;
b. 与streptavidin- PE孵育;
c. 上流式检测。
我的问题是: 我在第1步中用了Biotin-anti CD105 Ab和streptavidin-mcrobeads 结和,在第2步中,我用了Boitin- Anti CD105 Ab 和streptavidin- PE结合;这样的话会不会细胞结合不上?或者用另外什么问题? 请各位指教!!