SOS!!各位包涵体复性高手
发布于 2004-06-03 · 浏览 3331 · IP 江苏江苏
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我在复性的过程中遇到一些困难：
1.请问你复性多用什么方法，透析的效果好不好？
2.复性时的蛋白浓度多少为好，我看文献上浓度都很稀，那么复性后用什么方法浓缩呢？我将浓度定为300ug/ml，复性后用过硫酸铵和冻干的方法浓缩，但浓缩后就出现了不溶解的现象。请问不溶解的是没有复性的吗？那为什么它在复性的时候不沉淀，而到浓缩时才沉淀呢？
3.为了避免浓缩引起的不溶问题，我还试过在高蛋白浓度下用尿素梯度透析法复性，但透析的时间长了（约第四天），又出现了沉淀，这时取上清跑SDS-PAGE发现上清的东西是多聚体，但量很少，请问沉淀是否都是没有复性的蛋白呢？这是否说明复性得不好？
做得很头疼
1.请问你复性多用什么方法，透析的效果好不好？
2.复性时的蛋白浓度多少为好，我看文献上浓度都很稀，那么复性后用什么方法浓缩呢？我将浓度定为300ug/ml，复性后用过硫酸铵和冻干的方法浓缩，但浓缩后就出现了不溶解的现象。请问不溶解的是没有复性的吗？那为什么它在复性的时候不沉淀，而到浓缩时才沉淀呢？
3.为了避免浓缩引起的不溶问题，我还试过在高蛋白浓度下用尿素梯度透析法复性，但透析的时间长了（约第四天），又出现了沉淀，这时取上清跑SDS-PAGE发现上清的东西是多聚体，但量很少，请问沉淀是否都是没有复性的蛋白呢？这是否说明复性得不好？
做得很头疼
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3331
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