【求助】免疫细胞\组织化学中的细胞透化问题

最近做免疫荧光，碰上一个难题，就是细胞究竟应当透化到何种程度，可以让抗体顺利进入。不同的报道来源有不同的说法，一种是在封闭之前用适当的去垢剂处理几分钟，之后就不用了，一种在之后的封闭，抗体标记，洗涤中都加上去垢剂。后面的做法是不是太剧烈了？
我听说一种说法是去垢剂条件若是剧烈，会在细胞膜打出太多的空洞导致抗体结合之后又会飘出去？这种说法是否有依据？
还有一个问题，如果抗原是细胞膜上的膜蛋白，用了去垢剂处理之后是不是会破坏细胞膜而导致抗体无法结合上去？