【保姆级实验protocol 2】组织蛋白提取和浓度测定
组织蛋白提取和浓度测定是很多实验的前置步骤，所以很自然的，也是很多实验的基础和成功的关键。同样分享本人操作的方法，可能有缺点和不足，欢迎讨论。1. 物品准备：待测组织样本，RIPA（裂解液），PMSF（是一种丝氨酸/半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制剂），磷酸酶抑制剂（防止蛋白去磷酸化，需要看蛋白质磷酸化水平时需要使用），磁珠/锆珠，匀浆机，准备碎冰，标记EP管，低温离心机，移液枪，枪头。2. 蛋白提取步骤：1） 根据实验计划和分组，仔细标记离心管；2） 组织样本的准备：冰上/干冰称取标本20-50mg放入匀浆管中；3） 裂解液体系：RIPA组织细胞蛋白裂解液，加入PMSF（苯甲基磺酰氟，）及磷酸酶抑制
