【保姆级】石蜡切片HE染色+尼氏染色

发帖分享一些实验经验和protocol，最近想要积累一些人品，都是自己反复多次做的实验，欢迎讨论。

先来个简单的HE染色和尼氏染色。

放在一起是因为，这俩真的蛮简单，有些步骤也是重复的，熟悉了步骤相信大家有手就会嘻嘻。祝大家实验顺利，P＜0.05。

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NISSL染色

尼氏染色的基本原理：

尼氏染液是一种碱性染料，可以显示神经元中的核酸和蛋白质，使神经元的细胞体显示出特定的颜色。

1. 烘片 60℃ 1-2h（试过1小时足够，看实验安排，多烤一会没关系的）

2. 环保透化剂 2次，各30min。随后乙醇脱水： 100%—90—80—70—50—ddH2O 各2min。（透化剂到无水乙醇可在空中停留尽可能短）

3. nissl染色： 30min ， 20min看有无染上颜色（将染色温度提高到37-50℃可以使较厚的片子染得更均匀，可根据染色效果调整）。

4．ddH2O洗两次，每次数秒。随后95%乙醇 5s，100%乙醇 1min，透化剂 2次 各2min。

5. 封片：片子放于透化剂中，取出片子，甩下液体，滴树脂，加盖玻璃片。晾干后即可镜检。

HE染色

1. 烘片 60℃ 1-2h，同上。

2. 透化剂 2次，各30min。 乙醇： 100%—90—80—70—50—ddH2O 各2min。

（透化剂到无水乙醇可在空中停留尽可能短的时间）

3. 苏木紫染 10s（根据不同试剂摸索），流水脱色5-10min，根据染色深度调整。

4. 伊红染色 3-5min，流水脱色5min，同样需要根据染料和颜色深度调整。

5. 复水：dd水——50%-70%-80%-90%-100%，各2min。

6. 透化剂 2次 2-5min，同样注意酒精到透化剂中应迅速，避免切片吸收空气中的水分。

7. 封片，镜检。