【求助】质粒定点诱变!
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请教各位高手! 我是使用Stratagene公司的试剂盒做质粒定点诱变，试剂盒里面包括一个据说是超强转化功能的ＸＬ－ＢＬＵＥ细菌，在做诱变的时候我做了一个对照实验， 即： 将两份同样的原始质粒一份不加引物， 一份加引物同时进行ＰＣＲ突变， 尔后ＤpnI酶切，不加引物那管ＰＣＲ涂于Amp板上２４个小时后未有细菌小点长出， 而加引物的则长出了六个小点， 将该六个小点挑出转入含Amp, 氯酶素的ＬＢ中培养则无法长出浑浊液体，我无法解释这种现象． 首先对于DpnI酶切因为做了对照实验表明能完全切除原始未突变的质粒，所以逻辑推理上来讲长出的六个小点应该是所需要的突变质粒，但为何挑到含有Amp, 氯酶素的ＬＢ中就不再长了喃？ （ＸＬ－ＢＬＵＥ本身是氯酶素抗性的）．在此想听听各位高手的见解，谢谢！
