【求助】WESTERN封闭液可以选用二抗同源血清(3-4%)么?
:~)western做了快一个月了,结果都不太理想,怀疑是酶标二抗或是封闭液的问题,我的酶标二抗是在Jackson immune 公司买的,说明书上说推荐用与辣根酶标记二抗同一种属的血清,还说BSA 和脱脂奶粉可能含有anti-bovine IgG, antigoat IgG, anti-horse IgG, and anti-sheep IgG antibodies.Therefore, use of BSA and/or dry milk to block or dilute these antibodies and/or your primary antibody may significantly increase background and/or reduce secondary antibody titer.就是说如果用BSA或脱脂奶粉封闭可能会明显使背景增加或回降低二抗滴度,我现在的结果就是背景总是灰,片子不太理想,可推荐的是二抗同源血清,请问做WESTERN封闭液可以用二抗同源血清(〔3-4%,我的二抗是兔抗羊,所以我买了兔血清原液)么?我是这样考虑的,兔血清中含有的非白蛋白类物质会有负面影响,因为我没有看到有人做WESTERN用血清做封闭液的,大都是用BSA 或脱脂奶粉的。急切企盼园子里的高手们多多指点,倍加感谢
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2691