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期刊对Western Blot数据要求

发布于 2021-01-27 · 浏览 3108 · 来自 Android · IP 湖北湖北
这个帖子发布于 4 年零 95 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

WB 的使用比例在过去30年中稳定在8%到9%左右,而更为现代和准确的蛋白质谱技术(MS),在过去十年中应用比例则稳定在4%,仅仅是WB的一半。四十年后的今天,WB依旧是应用率最高的蛋白质分析技术。但是重现性和稳定性的问题,也使Western Blot技术处在风口浪尖上。因此,美国国立卫生研究院提倡提高科研重现性,呼吁研究界、科学出版商、大学、工业界和其他领域推动这一变化。率先响应的期刊有Science,Cell,Nature和JBC。那让我们来看看期刊都有哪些具体要求:

一、不建议跑平行胶,因为平行胶和剥离膜孵育体系,操作条件的不一致,影响定量的准确性,因此最好内参和目的蛋白要在同一张印迹膜上。

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二、选择宽动态范围的方法,确认信号强度与所上样量之间的线性关系,例如用胶片做化学发光方法的动态范围就很窄,不建议使用。

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三、强烈推荐使用总蛋白进行归一化,因为看家蛋白容易受处理条件影响而发生变化,影响定量的结果,使用总蛋白定量更真实地反映目标蛋白表达量的变化。


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四、提交原始数据,例如:JBC,PLOS和CELL等杂志都要求要提供原始数据。


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最后编辑于 2021-01-27 · 浏览 3108

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