【求助】为什么用oligo(dT)17也能反转录18rRNA?redearsqw分子生物学实验室医师 · 最后编辑于 2006-05-31 · IP 山东山东2084 浏览这个帖子发布于 19 年零 27 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。要做real-time PCR,选了几个内参都不合适,于是想用18SrRNA试一下,本来因该用随机引物反转录的,但由于定的 6 base随机引物没到货,就用原来oligo(dT)17反转录的cDNA为模板试了一下,没打算出带的,可结果出乎意料,居然有带,还很亮(24个循环)。这让我很不解啊,按理说18SrRNA是没有PloyA的,可为什么用oligo(dT)反转录的cDNA能扩增出带呢?而且后来发现也有文献用oligo(dT)反转录的cDNA为模板,扩增18SrRNA的(也是作内参用)。很不解阿,如果oligo(dT)能反转录18SrRNA,那么用PloyA-磁珠kit来纯化mRNA的岂不是会有大量的18SrRNA污染?不知道有没有人也碰到过这种情况,给个解释吧。