求助:关于NF-κB的一个基本问题!

我想检测药物对于TNF-a刺激后细胞的NF-κB表达的影响。
如果使用NF-κB P65的一抗,是否我需要提取的是细胞核蛋白?TNF-a刺激组的NF-κB P65表达较正常组会增加?药物如果对NF-κB的活化有抑制作用,则NF-κB P65表达会较TNF-a刺激组有所降低?
如果我使用I-κBa的一抗,是否我需要提取的是细胞浆蛋白?TNF-a刺激组I-κBa蛋白表达较正常组会降低?药物如果对NF-κB的活化有抑制作用,则I-κBa蛋白表达会较TNF-a刺激组有所增加?
我是否可以只使用一种抗体,只做一种蛋白就可以说明问题了?还是两种都有必要做?
问题可能太基础了,我刚刚开始作这方面,请各位多指教:)
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