关于融合蛋白的裂解液
发布于 2003-12-04 · 浏览 2183 · IP 陕西陕西
这个帖子发布于 21 年零 157 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我在做GST融合蛋白时,裂接细胞发现有三种缓冲液,请帮忙分析一下,是否一样,哪一种好:
终浓度
1) 1mol/L Tris-HCL(pH7.9) 50mmol/L
0.5mol/L EDTA 0.5mmol/L
5mol/L NaCL 50mmol/L
100℅甘油 5℅
用时加DTT，然后超声裂解。
2) Tris-HCL（Ph8.0） 20mmOL/L
NaCL 150mmol/L
NaN3 0.01℅
用时加PMSF1mmol/L, 溶菌酶0.5mg/ml,冰上静置30分钟,然后冰浴超声裂解.
3) Tris-HCL (Ph8.0) 50mmol/L
NaCL 0.1mmol/L
EDTA 1.0mmol/L
超声裂解加Trion-X 100 至终浓度 1.0℅[加Trion-X 100不知是否会使蛋白变性]
请大家帮我分析一下,谢谢
终浓度
1) 1mol/L Tris-HCL(pH7.9) 50mmol/L
0.5mol/L EDTA 0.5mmol/L
5mol/L NaCL 50mmol/L
100℅甘油 5℅
用时加DTT，然后超声裂解。
2) Tris-HCL（Ph8.0） 20mmOL/L
NaCL 150mmol/L
NaN3 0.01℅
用时加PMSF1mmol/L, 溶菌酶0.5mg/ml,冰上静置30分钟,然后冰浴超声裂解.
3) Tris-HCL (Ph8.0) 50mmol/L
NaCL 0.1mmol/L
EDTA 1.0mmol/L
超声裂解加Trion-X 100 至终浓度 1.0℅[加Trion-X 100不知是否会使蛋白变性]
请大家帮我分析一下,谢谢
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2183
4 2 点赞
