骨质疏松课题全套检测方案

一、动物标本（大鼠/小鼠）

1️⃣ Micro‑CT（核心金指标）

骨骼选择：股骨远端、胫骨近端、腰椎椎体

• 骨量参数：BMD（骨密度）、BV/TV（骨体积分数）

• 骨微结构：Tb.N（骨小梁数量）、Tb.Sp（骨小梁分离度）、Tb.Th（骨小梁厚度）、Conn.Dn（连接密度）、SMI（结构模型指数）

适用：去卵巢OVX、糖皮质激素、衰老型骨质疏松模型

2️⃣ 硬组织切片染色（树脂包埋）

1. （茜素红）-钙黄绿素双荧光标记：动态骨形成指标

◦ MAR（矿化沉积率）、BFR/BS（骨形成速率）

2. Von‑Kossa / Goldner’s Trichrome（戈德纳三色）：区分类骨质、矿化骨、类骨质厚度（O.Th）

3.脱钙做常规病理

HE：大体组织形态，观察骨髓腔、骨小梁形态

trap：破骨细胞数量

IF等

3️⃣ 血清生化（外周血）

骨转换标志物

• 骨吸收：CTX‑Ⅰ（Ⅰ型胶原C端肽）、TRAP‑5b

• 骨形成：PINP（Ⅰ型前胶原N端肽）、OCN骨钙素、ALP碱性磷酸酶

• 钙磷代谢：Ca²⁺、P、PTH甲状旁腺素、25‑(OH)‑VD3

4️⃣ 生物力学测试（万能材料试验机）

股骨三点弯曲、腰椎压缩试验

指标：最大载荷、弹性模量、断裂能量，反映骨骼力学强度

二、细胞水平（体外机制验证）

成骨细胞

1. 染色：ALP染色、茜素红S矿化结节染色

2. PCR：Runx2、Alp、OCN、Col‑1α1

3. WB：Runx2、OSX、β‑catenin等通路蛋白

破骨细胞

1. TRAP染色，计数多核成熟破骨细胞

2. 骨吸收坑实验（骨片吸收实验）

3. PCR：Rank、Trap、Nfatc1、Ctsk、Dcstamp

4. WB / ELISA：NFATc1、CTSK等

最简基础套餐推荐（适合常规毕业课题）

1. Micro‑CT（股骨+腰椎）

2. 脱钙做Goldner、TRAP染色

3. 血清CTX‑Ⅰ、PINP、ALP、钙、维生素D

4. 三点弯曲力学实验

5. BMM破骨诱导+TRAP染色、qPCR（RANKL/OPG/NFATc1）

高分文章进阶套餐推荐

增加：钙黄绿素动态标记、骨形态计量学定量、骨吸收坑、Micro‑CT伪彩可视化、免疫荧光共定位

micro ct

钙黄绿素双标

von kossa