免疫组化：一抗与二抗的特点

免疫组化是应用免疫学基本原理——抗原-抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry, IHC)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry, ICC)。

一抗与二抗的选择是该实验技术成功与否的关键，今天给大家讲讲一抗与二抗的特点。

大家看上图（上图为抗体结构示意图），V区为可变区，是一抗识别目标抗原相应抗原决定簇的重要结构部位，如果一抗是单克隆抗体，那这类一抗只能识别抗原的一种抗原决定簇，也就是特异性较强，但是如果一抗是多克隆抗体（相当于抗体混合物），那这类一抗能识别抗原的多种抗原决定簇，这也就导致其特异性弱于单抗。

大家再看图片的下方为C区（Fc),该区是恒定不变的区域，每个种属的Fc区都是不同的，所以二抗结合的区域就是恒定区。这就是为什么二抗有种属特异性的原因。

也就是一抗是为了识别结合靶标抗原（其没有种属特异性，只要抗原的表面决定簇空间结构相似，一抗都可以应用，所以市面上大部分一抗可用于多种属）；但是二抗具有种属特异性，需要根据一抗的选择来确定二抗的来源。

比如：实验动物是小鼠，如果一抗选择兔抗小鼠，那么二抗只能选择非小鼠非兔来源的二抗，如羊抗兔。