质粒与6xloading buffer不反应变色，无条带

质粒提取的时候最后一步洗脱用的是水，没用洗脱液。浓度100ng/ul，pcr后条带明显，送测序结果也对得上。过几天用双酶切的时候，原始质粒和6xloading buffer混匀几乎都不变色，理应质粒和6x混匀是深蓝，酶切前后的质粒条带都跑不出来。

是不是质粒洗脱用水不够干净，蛋白质残留？还是与6xloading buffer加样比例不对？怎么让质粒纯化？