质粒扩出来lncRNA全长测序
找公司合成的含有lncRna全长的质粒,然后在lncrna首位设计引物,用高保真酶做pcr,得到lncrna产物后跑了琼脂糖,和DNAmarker对比我的全长也和lncrna全长符合。收胶纯化后送测序老是只能测出1000bp左右,用的是扩全长的引物去测序,双向测通,lncrna全长是3000多。不知道是不是因为我的引物质量不好?选通用引物会好一点吗?测序结果前向引物说缺失突变,后向引物信号衰弱🙏🙏🙏🙏
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 771
找公司合成的含有lncRna全长的质粒,然后在lncrna首位设计引物,用高保真酶做pcr,得到lncrna产物后跑了琼脂糖,和DNAmarker对比我的全长也和lncrna全长符合。收胶纯化后送测序老是只能测出1000bp左右,用的是扩全长的引物去测序,双向测通,lncrna全长是3000多。不知道是不是因为我的引物质量不好?选通用引物会好一点吗?测序结果前向引物说缺失突变,后向引物信号衰弱🙏🙏🙏🙏
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