皮肤组织HE切片的一个问题探讨

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实验名称：

皮肤组织HE染色

实验目的：

制作皮肤组织切片，通过HE染色，观察细胞形态，给出病理诊断。

实验过程（1-10）：

1.固定：皮肤组织经过活检取材，放入10%的甲醛溶液固定24h-48h

2.脱水和透明：组织按梯度脱水，65%酒精脱水3h，85%酒精脱水2h，95%酒精脱水1h，95%酒精①过夜持续到第二天8:00，95%酒精②1h，100%酒精①1h，100%酒精②1h，100%酒精和环保透明剂混合液0.5h，环保透明剂①0.5h，环保透明剂②0.5h。

3.浸蜡：组织浸蜡3h

4.包埋

5.蜡块切片（粗切：50um；细切：6um）

6.捞片（温度：48摄氏度）

7.烘片（温度：70摄氏度；时间：20min）

8.烤片（温度：80摄氏度；时间：30min）

9.染片：二甲苯①25min，二甲苯②25min，100%酒精2min，95%酒精10s，75%酒精10s，凉水30s，苏木素5min，凉水过滤未结合的苏木素染液，盐酸酒精分化1-3s，温水反蓝30s-1min，水溶性伊红5-8s，温水洗去未结合的染液，65%酒精脱水，75%酒精脱水，95%酒精脱水，100%酒精①脱水，100%酒精②脱水，切片浸入二甲苯。

10.封片

实验问题：HE切片中皮肤组织中胶原灰染异染，硬结成块，胶原异常。

解决方案：调整烘片和烤片的时间温度，结果恢复正常。（由于每次捞片捞完一张就放入烘片机上烘烤，每张切片烘烤的时间不一致，导致部分切片胶原异常）。改良措施：捞片完成后不立即放入烘片机，找一张木板，将所有捞完的切片放入其中，等俵片全部结束后统一放入烘片机烘干。

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