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[求助]【求助】 Hela 细胞转染后筛选的疑问

最后编辑于 2022-10-09 · IP 广东广东
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这个帖子发布于 19 年零 211 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位战友:
我要把构建好的pCDNA3.1重组质粒转进Hela细胞,打算做稳定表达,目前正在摸索G418的筛选浓度,有几点疑惑,请教大家,请赐教。
1 我打算在24孔板做转染,转染之后按照说明书上说的要做1:10传代,这个1:10的意思是不是把转染后的1孔细胞消化之后铺到10个孔中?
2因为我只有24孔的板,没有其他的板,那么在传代之后24h之后加入G418筛选,假如克隆出现了,该怎么办呢?
3 还有这个1:10传代,能不能传代培养瓶中呢,不想浪费板了,假如24孔板的1孔能传几个小的培养瓶中呢?
三个问题请大家赐教,谢谢了!




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