琼脂糖凝胶电泳问题,小白求助大神求解答

新手科研小白一个,最近要做CRISPR/Cas9,经费有限,买了质粒载体准备做脂质体转染到细胞的方法来敲除靶基因。目前的问题就是,我从公司拿到的菌液培养到固体平板上挑了单菌落过夜培养后,试剂盒提取质粒,测了浓度(如图)最后一次浓度都挺好的,但是跑核酸胶一直跑不出来,前后跑了三次(荧光质粒一直没有条带),前后三次改进了电泳时间,核酸胶浓度,以及样品上样量,最后一次sg条带都有,荧光质粒仍旧没有条带。求助大神解答!(球球各位好心人帮帮我,整天被老板骂,压力好大。)
PS:mNeongreen(荧光质粒全长13012bp),sgRNA(质粒全长9079bp),marker用的8000bp,
1%琼脂糖胶配制:0.4g琼脂糖溶于40mL1xTAE+4uLGelRed染料
0.8%琼脂糖胶配制:0.32g琼脂糖溶于40mL1xTAE+4uLGelRed染料



最后编辑于 2023-11-25 · 浏览 1326